纳米颗粒Gd@C82（OH）22抑制哺乳动物细胞外排转运的研究.pdfVIP

四川动物2010年第29卷 第 1期 SichuanJournalofZoology Vo1．29 No．1 2010 纳米颗粒 Gd@C82(OH)22抑制哺乳动物细胞外排转运的研究 、 昔 奔 ． 哜军” (1．四川大学纳米生物医学技术与膜生物学研究所，成都 610041；2．国家纳米科学中心，北京 100190) 摘要：目的 探讨纳米颗粒Gd@C (OH)体外对哺乳动物细胞外排转运的影响，研究该外排转运抑制作用与 MRPI蛋白和ATP酶活性问的关系，为Gd@C (OH)应用于耐药肿瘤治疗提供初步实验依据。方法 通过Calcein— AM(C—AM)摄入法，以仓 鼠肾细胞BHK一21、转染表达多药耐药相关蛋 白MRP1的BHK一21／MRP1细胞以及肿瘤细胞 PC一3为模型测定Gd@C (OH)对细胞外排转运的整体影响；用比色法测定 Gd@C8(OH)对MRP1蛋白截短体及 BHK-21／MRP1质膜微囊的ATP酶活性的影响。结果 经 Gd@C (OH)：处理后，3种细胞的C—AM摄入量均上调， BHK-21与BHK一21／MRP1摄入量增加相似；用 MRP1抑制剂MK571处理 BHK一21／MRP1后，细胞 C。AM摄入增长趋势 不变；Gd@C (OH)对MRP1蛋白截短体及质膜微囊的ATP酶活性没有抑制作用。结论 表明Gd@C：(OH)可抑 制哺乳动物细胞的外排转运，其抑制作用并不是通过抑制MRPI蛋白或ATP酶活性来实现的。 关键词：Gd@C：(OH) ；转运蛋白；MRP1；ATP酶活性 中图分类号：R979．1 文献标识码 ：A 文章编号：1000—7083(2010)叭 一0037—04 NanoparticleGd@C82(OH)22InhibitstheEffiuxTransporterofMammalianCells HUANGBenl．ZHAO Xiao—iun” (1．InstituteforNanobiomedicalTechnologyandMembraneBiology，SichuanUniversity，Chengdu610041，China； 2．NationalCenterforNanoscienceandTechnoloyg，Beijing100190，China) Abstract：Objective Tostudytheeffectofnovelanti—tumornanoparticlesGd@C82(OH)22ontheeffluxtransporterand therelationshipamongMRP1proteins，ATPaseactivityandthiseffect．Methods TostudytheeffectofGd@C82(OH)22on theeffluxtransporter，theCalcein—AM(C—AM)intakeassaywasusedonhamsterkidneycelllinesBHK一21，BHK-21／MRP1 whichexpressesMRP1．andhumanprostatecancercelllinePC-3．TheeffectofthisnanopartieleontheATPaseactivitiesof MRP1truncatedproteinNBD1一GST—NBD2andplasmamembranevesicleswereassessedbycolorimetry．Results Allgroups treatedwithGd@C82(OH)22hadanincreasinguptakeofC—AM，whiletheincreaseintheamountofBHK一21isroughlythe sameasthatofBHK一21／MRP1．AftertreatmentwithMK571，anMRP1inhibitor，theGd@C82(OH)22treatedBHK一21／ MRP1rgoupdidn’tshowanyreductioninthisamount．Th