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第36卷 第1期 曲 阜 师 范 大 学 学 报 Vol_36 No．1 2010年 1月 Journal of Qufu Normal University Jan．2010 不同预处理方法对秸秆固态发酵产纤维素酶的影响 侯 丽丽①② 车程川①， 杨 革① ， (① 曲阜师范大学生命科学学院，273165，山东省曲阜市；②南京林业大学江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室，210037，江苏省南京市) 摘要 ：以稻草秸秆为原料，经不同方法预处理后用于固态发酵产纤维素酶．以羧甲基纤维素酶(CMC) 酶活力和滤纸酶(FPA)酶活力为指标 ，比较了不同预处理方法对后续绿色木酶固态发酵产纤维素酶的影响． 研究结果表明，微波联合稀酸预处理秸秆最有利于发酵产纤维素酶，并通过正交试验得到了最佳的预处理条 件：基质浓度 7％，HSO浓度2％，在 180W 的微波功率下处理稻草5min．在此条件下得到的单位能耗的酶 活增加量最高，CMC酶活和FPA酶活分别比未经处理的稻草发酵后所得酶活提高了135．6％和82．7％． 关键词 ：绿色木霉；秸秆预处理；固态发酵；纤维素酶 中图分类号：$216．2 文献标识码 ：A 文章编号：1001．5337(2010)01-0100-04 地球上最丰富的自然资源是 由光合作用而生成 1 材料与方法 的植物纤维素物质，到 目前为止纤维索类资源仍没 有得到更好的利用，绝大多数不仅被白白的浪费，还 1．1 实验材料与主要仪器 造成了环境污染．纤维素的利用和生物转化对于解 1．1．1 菌种 绿色木霉(Trichodermaviride)金 1 决世界能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有重 号，作者所在实验室保藏． 大意义 ¨。．近年来人们开始利用秸秆等木质纤维 1．1．2 培养基 液体种子培养基 ：称取 10g麦麸， 素原料生产燃料 乙醇，然而，纤维素酶的使用成本 加入 100mL蒸馏水，煮沸30min，4层纱布过滤后， 高，而且酶活力比较低成为制约这一技术工业化应 用的关键因素 ．纤维素酶固态发酵凭借其低成 加入2g葡萄糖，待溶解后补加蒸馏水至 100mL． 本、高产出、低能耗及低污染等优势，13益受到关 在 500mL锥形瓶 中装入 50mL种子培养基，在 115 注 J．为进一步降低纤维素酶生产成本，固态发酵 ℃下灭菌20min． 选用廉价的秸秆作为基质，但由于秸秆中纤维素大 固体发酵培养基 ：玉米秸秆粉 6g(过 40 目 多以结晶态存在 ，加上木质素的缠绕和包裹，不溶于 筛)，麦麸 4g，营养盐溶液 20mL，121oC灭菌 水，在环境中比较稳定，从而形成了微生物降解纤维 40min．营 养 盐 溶 液 组 成 (／L)：KH2PO 2g， 素的强大障碍，因此，对其进行适当的预处理是高效 (NH4)2SO41．4g，MgSO4·7H203g，CaC120．3g， 利用秸秆的重要措施』．常用的预处理方法包括物 FeSO4 ·7H2O 0．005 g，MnSO40．0016 g ，ZnC12 理法、化学法、生物 法 以及三种 方法 的综合 利 0．0017g，CoC120．002g． 用 ．本研究利用廉价的稻草为原料，就微波、稀 1．2 实验方法 酸、