针刺和神经生长因子治疗脑性瘫痪的机理与研究.pdfVIP

针刺和神经生长因子治疗脑性瘫痪的机理研究 二 摘要 二 摘要 针刺和神经生长因子治疗脑性瘫痪的机理研究 目的： 探讨针刺和神经生长因子（nerve growth factor ，NGF ）疗法对缺氧缺血性脑损伤 （Hypoxic-ischemic brain damage ，HIBD ）幼鼠总体功能、凋亡及抗凋亡基因的表达 和大脑组织病理形态学的影响，对针刺、NGF 疗法治疗小儿脑性瘫痪（Cerebral palsy ， CP ）的机理进行探索，为临床新生儿CP 及幼儿CP 后遗症的治疗提供理论依据。 研究内容和方法： 1、8 窝7d 龄体重12g 新生SD 幼鼠按区组随机分为①正常组②假手术组。余下 幼鼠造模，建立HIBD 幼鼠CP 模型。成功模型按区组随机分为③模型组，④单纯针刺 组，⑤针刺+NGF 组。 2 、按计划对实验幼鼠进行干预及检测体重、悬吊试验、斜坡试验和Y 迷宫试验。 3、术后18 天取材，用荧光定量PCR （SYBRGreen I 染料法）检测其脑组织BCL-2、 BAX、Casp3 基因mRNA 表达；用HE 染色法观察其海马组织病理形态学改变；计数正常 神经细胞数目；用TUNEL 法检测其脑细胞凋亡情况。 结果： 1、脑组织大体：造模后存活的36只SD幼鼠中，33只出现翻身不能,平衡异常和左旋， 造模成功。实验结束取材时可见：③模型组左侧脑组织出现大面积坏死，空泡；①正 常组、②假手术组脑组织未见异常；④单纯针刺组、⑤针刺+NGF组左侧脑组织也出现 了坏死和空泡，但都比③模型组轻，同时⑤针刺+NGF组比④单纯针刺组更轻。 2 、体重变化：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯针刺组，⑤针刺 2 － － 针刺和神经生长因子治疗脑性瘫痪的机理研究 二 摘要 +NGF 组幼鼠术后18 天体重均数更高，体重增长趋势更强，差别有统计学意义。⑤针 刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别无统计学意义。 3、悬吊试验：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯针刺组，⑤针刺 +NGF 组幼鼠术后16 天悬吊试验结果均数更高，肌力增强趋势更强，差别有统计学意 义。⑤针刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别有统计学意义。 4 、斜坡试验：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯针刺组，⑤针刺 +NGF 组幼鼠术后16 天斜坡试验结果均数更低，协调能力健全趋势更强，差别有统计 学意义。⑤针刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别无统计学意义。 5、Y 迷宫试验：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯针刺组，⑤针 刺+NGF 组幼鼠术后18 天Y 迷宫试验结果均数更高，差别有统计学意义。⑤针刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别有统计学意义。 6、BCL-2 基因mRNA 表达：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯 针刺组，⑤针刺+NGF 组幼鼠BCL-2 基因mRNA 表达A 值均数更高，差别有统计学 意义。⑤针刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别无统计学意义。 7、BAX 基因mRNA 表达：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，⑤针刺+NGF 组幼鼠BAX 基因mRNA 表达A 值均数更低，差别有统计学意义。④单纯针刺组与③ 模型组相比，差别无统计学意义。 8、Casp3 基因mRNA ：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯针刺组， ⑤针刺+NGF 组幼鼠Casp3 基因mRNA 表达A 值均数更低，差别有统计学意义。⑤ 针刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别无统计学意义。 9、病理形态学改变：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯针刺组， ⑤针刺+NGF 组幼鼠海马变性神经细胞数量显著减少，病理形态学明显改善。 10、海马正常神经细胞数目：与③模型组相比，①正常组，②假手术组，④单纯 针刺组，⑤针刺+NGF 组幼鼠海马正常神经细胞数均数更高，差别有统计学意义。⑤ 针刺+NGF 组与④单纯针刺组相比，差别无统计学意义。 11、脑皮质