秸秆还田土壤中高效纤维素分解菌筛选、鉴定及其生物效应与研究.pdf

摘要 中国是农业大国，年产各种农作物秸秆约8．O亿t，占世界秸秆总产量的20％ 30％，其中绝大部分作为废弃物被丢弃焚烧，不仅浪费了资源，也造成了严重的环境 问题。秸秆还田是当今世界上普遍关注的一项培肥地力和增产增效的农艺措施，但还 田玉米秸秆存在腐解难的问题，如何加速还田玉米秸秆的腐解是目前研究的热点。本 研究采用纤维素一刚果红染色法从河北省山前平原小麦一玉米轮作区且长期秸秆还田 的小麦季农田土壤中分离筛选出高效分解纤维素的菌株，在优化其产酶条件、发酵条 件和CMC酶活力的基础上，进行了该菌株对玉米秸秆的腐解能力、土壤中固定态磷 的释放和小麦生长及其磷营养状况的影响等方面研究。主要研究结果如下： 1．采用纤维素一刚果红染色法，经形态鉴定初步筛选出具有纤维素分解菌真菌8 株，细菌20株；进一步采用水解圈测定，酶活力比较分析，得到高效纤维素分解真 菌1株，编号为HBl，经18S oxalicum)，命名为草酸青霉HBl(只oxalicumHBl)，该菌株现保藏于中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCCNO．4842；得到 无芽孢杆菌；室内摇瓶试验研究了草酸青霉HBl和3株细菌的生长曲线，并对内切 酶活力最高，因此对该菌株展开如下系统的研究。 2．草酸青霉HBl菌株发酵条件的优化 首先选择氮源、接种量、培养温度、发酵时间、培养基初始pH进行单因子试验， 对草酸青霉产酶条件的影响，结果表明该菌最佳产酶条件为3％的牛肉膏蛋白胨为氮 采用正交设计研究了pH、温度、固液比和培养时间四因素对草酸青霉HBl菌株发酵 的影响，综合考虑CMC酶、FPA酶、纤维素酶、半纤维素酶四种酶活力，该菌株最 优发酵条件为固液比为1：10，培养时间为48h，培养温度为30℃，pH为6．5。 在草酸青霉HBl菌株作为纤维素分解菌，以CMC．Na液体培养作基质，研究CMC 围内，酶反应的最适温度为50℃，其热稳定性在40℃-～50℃之间。 3．草酸青霉HBl对玉米秸秆腐解能力评价 采用室内摇瓶试验、土样培养试验及小麦盆栽试验对其进行了系统研究。利用 达888．8U。从腐解秸秆的形态特征发现，草酸青霉HBl处理的秸秆与对照相比形态发 生明显改变，在培养10d后，秸秆腐解率达87．3％，为对照的1．90倍；初步说明该菌株 具有较强的玉米秸秆腐解能力。在土壤培养试验中，培养30d时，接种草酸青霉HBl 的土壤中玉米秸秆的腐解率达83．5％，是对照的1。62倍；在小麦盆栽试验中，培养50d 时，接种草酸青霉HBl的土壤中还田秸秆腐解率达70．8％，高于对照15．1％。 4．土壤中接种草酸青霉HBl的解磷作用及其生物效应研究 土壤培养试验以及小麦盆栽试验研究还表明，接种草酸青霉HBl有利于土壤固 定态磷的释放和提高植物对磷的吸收利用。在土壤培养30d时，处理组和对照组中土 与其对照组差异显著；同时有利于植物的生长，在培养30d时，小麦植株生物量增加 16．8％。 本试验所获得的草酸青霉HBl对玉米秸秆腐解的同时在土壤中解磷的特性还未 见其他作者报道，具有进一步利用研究的价值。 关键词：秸秆还田土壤；纤维素分解菌；酶活力；：玉米秸秆腐解；生物效应 Isolationof bacteriainsoilwith straw cellulose-decomposinglong-term and onthe effects returningstudy biological Author：LipingGeng Liu Supervisor：ProfessorWenju ProfessorLu Xiujun Science Major：Soil