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江浙短尾蝮蛇毒解离素的抗肿瘤血管，上成作Hj研究
摘 要
解离素(disintegrin)是一类富含半胱氨酸的小分子多肽，其含有精．甘．天冬
氨酸(RGD)序列或赖．甘．天冬氨酸(KGD)序列能抑制依赖此识别位点的整合
素与其配体结合，从而抑制血小板聚集形成瘤栓、肿瘤血管新生，达到抑制肿瘤
细胞侵润、迁移的目的。本文拟从江浙短尾蝮(Gloydius
毒中分离纯化解离素GBV-IV4，并测定生物学活性，观察其抑制血管生成和肿瘤
转移作用。为进一步开发利用提供实验依据。
1．江浙短尾蝮蛇毒解离素的分离纯化
根据福建医科大学蛇毒所分离纯化江浙短尾蝮蛇毒解离素的方法应用
Fast
75凝胶过滤色谱、DEAE Flow离子交换色谱和
Superdex Sepharose
C18反相色谱等技术从江浙短尾蝮蛇毒中分离纯化解离素GBV-IV4。
Lichrospher
典的Born法，证明其能抑制ADP诱导的血小板聚集。
2．GBV-．IV4对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成的影响
可剂量依赖地抑制HUVEC管腔形成。GBV-IV4
0．15、0．3和0．6mg／ml使小管形
180．944±68．178(¨m)和71．25±61．26(斗m)。
3．GBV-IV4对b．FGF诱导的小鼠体内基质胶血管生成的影响
小鼠体内基质胶血管生成实验检测GBV-IV4对血管生成的影响。组织切片
免疫组化染色后计数b-FGF阳件对照、b-FGF+GBV-IV4
1．25mg／kg、b-FGF+
GBV-fi／4
赖地抑制基质胶内微血管的形成，b-FGF组微血管数为17．13±3．20，
b-FGF+GBV-IV4
1．25mg／kg、b-FGF+GBV-IV42．5mg／kg组分别为9．80+1．95和
2．33±0．75，PBS细为0．4±0．44。
3
江浙短尾蝮蛇毒解离素的抗肿瘤血管生成作用研究
4．GBV-IV4对小鼠黑色素瘤细胞B16FI实验性肺转移的影响
1．25mg／kg和2．5mg／kg能显著减少转移瘤数，PBS、GBV-IV41．25mg／kg和
34．21。免疫组化染色显示GBV-IV4
1．25mg／kg和2．5mg／kg能显著减少肿瘤组织
内血管的新生，PBS、GBV-IV4
1．25mg／kg和2．5mg／kg作用下肿瘤结节内微血管
数分别为28．40±2．70、24．4±3．36和11．4±5．77。
Fast
75凝胶过滤色谱、DEAE Flow离子交换色
结论：用Superdex Sepharose
C18反相色谱从短尾蝮蛇毒粗毒中分离解离素是稳定、可行的
谱和Lichrospher
技术路线。GBV-IV4能抑制ADP诱导的血小板聚集及具有较强的抗肿瘤血管生
成作用。
关键词： 短尾蝮蛇毒解离素整合素
血管生成肿瘤实验性肿转移
4
江浙短尾蝮蛇毒解离索的抗肿瘤血管生成作刖研究
Abstract
whichcontainsthe
Disintegrin aminoacid
sequence
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