类风湿关节炎滑膜Foxp3-%27%2b-调节性T细胞浸润的临床相关性与研究.pdf

‘参中山，己d擎 类风湿关节炎滑膜Fo；p3·调节性T细胞浸润的临床相关性研究 类风湿关节炎滑膜Foxp3+调节性T细胞浸润 的临床相关性研究 学位申请人：曾燕(2005级临床科研型硕士研究生) 导 师：戴冽主任医师中山大学附属第二医院风湿免疫科 摘 要 研究背景 类风湿关节炎(RA)是一种常见的以进行性关节软骨和骨毁损为特征的慢 性炎症性自身免疫性疾病，多见于中年女性，在我国的患病率为O．32％～O．36％， 临床丰要表现为对称性、慢性、进行性多关节炎，造成关节软骨、骨和关节囊破 坏，最终导致关节畸形和功能丧失，是造成人群劳动力丧失和致残的主要病因之 一。目前RA的病因和发病机制尚未完全阐明，治疗主要采用非甾类抗炎药控制 症状及改善病情药(DMARDs)延缓关节破坏的进展。然而，临床上有相当一部分 的患者对传统的改善病情药无效，因此寻找治疗RA的新靶点具有重要的意义。 免疫耐受对于维持体内免疫平衡和防止自身免疫性疾病非常重要，其中外周 耐受是维持免疫耐受的重要机制。近年来，一种新型免疫抑制性T细胞即调节性 T细胞(regulato呵T 主动抑制作用是引发外周免疫耐受的主要部分。越来越多的研究表明 CD4+CD25+Tregs可抑制病理性免疫反应的发生，维持自身免疫耐受，在抑制自 身免疫性疾病、肿瘤免疫、移植耐受中具有重要作用。研究发现无论是胸腺来源 并在Tregs的发育和免疫调节功能的发挥过程中具有重要的作用。目前CD4+ CD25+Treg细胞在RA中的研究不多，主要集中在外周血和滑液中，研究表明， RA患者外周血及关节局部存在调节性T细胞数量和功能的变化。然而目前尚未有 关于RA滑膜局部的调节性T细胞与临床疾病活动性及关节破坏关系的报道。 ‘》中山，巳謦 类风湿关节炎滑膜F。xp3·调节性T细胞浸润的临床相关性研究 研究目的 I晦床疾病活动性及关节破坏指标的关系，探讨调节性T细胞在RA发病机制中的 可能作用，为治疗RA探索新的靶点。 材料与方法 1．研究对象及标本来源 膝oA分类标准。16例非炎性关节病患者，诊断包括半月板或韧带损伤、骨折、 无菌性股骨头坏死、滑膜皱襞综合征等并排除RA、OA等炎性关节病。 activescore28， 等三个客观参数计算疾病活动度评分28(Disease DAS28)。计 算公式如下： 0+1．15 (临床意义：轻度活动3．2，中度活动≥3．2且≤5．1，重度活动5．1，临床缓 解2．6) RA组滑膜均取自细针滑膜活检术；OA组及非炎性关节病组滑膜取自关节 镜手术、关节置换术或细针滑膜活检术。 2．实验方法 (1)细针滑膜活检方法盲式细针滑膜活检术获取滑膜组织，滑膜组织离体 后立即用4℃的lO％中性福尔马林固定，24小时后予常规脱水、石蜡包埋。 (2)25例活动期RA滑膜、14例0A和16例非炎性关节病滑膜连续切片、 色．。 ◇中山犬擘 类风湿关节炎滑膜Foxp3·调节性T细胞浸润的临床相关性研究 百分数，分析Foxp3+Tregs与滑膜炎病理学评分、临床疾病活动性及关节破坏指 标的关系。 3．观察指标 (1)病情活动性指标 ①临床指标：关节功能分级、28个关节压痛／肿胀指数、晨僵时间、双手平 均握力、疼痛VAS评分、HAQ评分、关节炎影响指数(AIMS)。 ②血清指标：EsR、C反应蛋白、类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体。 ③疾病活动度：DAS28评分。 (2)放射学关节破坏指标 采用双手Sharp评分法计算双手X线狭窄评分、侵蚀评分和Sha印评分。由 实验者和放射科专业人员双盲进行评分。 (3)滑膜病理学评分 将所有滑膜标本进行编号，由实验者和病理学专业人员双盲进行各项病理学 分析。只对具有完整衬里层的滑膜(完整滑膜)进行观察，每一份滑膜标本中至 少有3个完整滑膜。 ①滑膜炎积分：对HE染色的所有完整滑膜根据滑膜衬里层增生情况、炎症 浸润程度和滑膜基质活化情况进行滑膜炎积分评分。三种病理学改变按照轻重程 度分别进行O～3分半定量评分。将三种分数相加即