奶粉中维生素 A、D3、E 的含量.pdfVIP

应用文集 DGLC-26 在线二维柱切换- 高效液相色谱法同时测定婴幼儿强化 奶粉中维生素A 、D3 、E 的含量 关键词：高效液相色谱；维生素D；维生素Ａ；维生素Ｅ；二维色谱；婴幼儿配方奶粉 DGLC-26 Simultaneous qualification of vitamins A, D3 and E in fortified Infant formulae by Liquid Chromatography Coupled with Fully Automated Online two-dimensional column switching method Key words ：Two-dimensional separation, vitamin D, vitamin A, vitamin E, high performance liquid chromatography, dual gradient system，Fortified Infant formulae 引言 婴幼儿配方奶粉又称为母乳化奶粉，是一种以牛乳（或其他动物乳）为主要原料，通过调整成分模拟母乳， 可供婴幼儿生长和发育所需要的一种人工食品[1] 。根据国家标准中奶粉营养成分有关规定，维生素指标中必 须强化的包括维生素A 、维生素D 和维生素E 及其他水溶性维生素等；其中维生素D 在实际母乳中含量极低， [2~4] ，主要对应形式为维生素D 和25-OH 维生素D [4~5] ，因此通 约为4–40 IU （国际单位）/L （0.1–1.0µg/L ） 3 3 [5~6] 常将维生素D3 制成水可分散性的微粒形式，添加到婴幼儿强化奶粉中 。关于奶粉中维生素A 、D 和E 的 测定方法，文献报道较多，其中高效液相色谱法是常用的分析方法。由于样品基质复杂，三种维生素对温度、 光照、氧气和极端的pH 值较敏感，且多数经过包被后再添加到食品基质中[7] ，因此分析方法常包括皂化破壁、 [8~9] [9] 有机溶剂萃取，浓缩和净化等步骤 ，在现行标准分析方法中 需采用正相制备色谱、反相分析色谱两套 仪器，分别进行净化制备和分析，前处理过程极其繁琐，大大影响样品分析效率。 本文首次采用在线二维柱切换- 高效液相色谱紫外检测法，样品经过皂化、萃取后，直接进样，同时完 成维生素A 、D 和E 的分析测定，提高了方法的准确性和样品分析效率。 测试条件 仪器：Ultimate DGP 3600 系列，包括带有在线脱气单元的双三元梯度泵；带有两个六通阀的柱温箱；紫 外检测器。连接图见图1。 一维分析柱：Acclaim 120 C18 ，3µm 3.0 ×150mm 二维分析柱：Acclaim 120 PA ⅡC18 ，3µm 4.6 ×150mm 柱温：30 ℃ 检测波长：0~5min ，325nm ；5~12min ，296nm ；12~30min，263nm 进样量：50µL 流速： 0.8 ml/min 流动相组成： 一维分析泵：A ，乙腈；B ，甲醇；C ，为甲醇－四氢呋喃（80 ：20 ） 二维分析泵：A ，乙腈；B ，异丙醇 流速：0.8mL/min 梯度洗脱程序：见表1 图1 仪器连接图 表1 一维分离和二维分离梯度程序 一维分析泵 二维分析泵 时间（min ） A% B% C% 时间（min ） A% B% Time （min ）