胰岛细胞移植治疗大鼠Ⅰ型糖尿病实验研究.pdfVIP

论文摘要 论文一 猪胰岛的分离与纯化实验 [摘要] 目的：分离、纯化成年香猪胰岛，并测定其生物活性，以 提供大量高质量胰岛细胞满足移植需求。 方法： 采用胶原酶胰 导管注射负荷技术，静止消化猪胰腺体尾叶：葡聚糖不连续密度梯 度比重离心纯化。双硫腙染色法进行胰岛细胞鉴别：计算胰岛细胞 纯度、胰岛细胞产量；用荧光染色法计算胰岛细胞活性。葡萄糖刺 激胰岛素释放试验检测分离纯化后的胰岛细胞功能。 结果：胰岛 7个胰岛细胞／ 细胞纯度约85％±4％。胰岛细胞产量约(4-7)×10 每只猪。纯化后胰岛细胞数为4367±1876个／g胰腺。胰岛细胞活 性95％±3％。葡萄糖刺激胰岛素释放试验，培养一天时，胰岛细胞 mU／L和890．20± 刺激分泌胰岛素量分别为408．23±56．40 6．7mmol／L葡萄糖)刺激分泌胰岛素量分别为 糖)和高糖溶液(1 糖组与一天低糖组分泌量有显著性差异(p0．01)；五天高糖组与 五天低糖组分泌量亦有显著性差异(p0．01)。而一天高糖组与五 天高糖组以及一天低糖组与五天低糖组间的胰岛素分泌量无差异。 结论：本实验提供了成年香猪分离纯化胰岛细胞的有关数据，其纯 度及生物学活性均令人满意。提示成年香猪胰岛可作为供体用于异 种移植。 [关键词] 猪； 胰岛； 分离； 纯化 论文二 糖尿病大鼠腹腔内移植 微囊化猪胰岛疗效观察 [摘要] 目的：将实验一中的已分离纯化的胰岛细胞，经微囊化移 植于I型糖尿病大鼠腹腔，观察血糖及胰岛素变化。 方法：SD大 鼠注射四氧嘧啶制备24只。经三周后与正常鼠(6只)对比摄食量、 饮水量、尿量、血糖值、尿糖值和胰岛素值判定是否合格。正常组 6只：微囊组病鼠12只，每只接受1×106个微囊胰岛腹腔植入； 空囊组12只病鼠，接受同等量空囊腹腔植入。自鼠尾静脉取血， 血糖仪测定血糖值，放射免疫法测胰岛素分泌量。分别予移植前、 结果：造模大鼠第21天摄食量 移植后7天、30天、90天采样。 与正常鼠对比有显著差异(pO．01)，其饮水量、尿量与正常鼠对 比有显著差异(pO．001)；空腹24小时测得的血糖、尿糖、胰岛 素值与正常鼠对比也有显著差异(pO．001)。为合格I型糖尿病大 鼠模型。微囊胰岛细胞移植后糖尿病大鼠血糖下降至正常水平，与 移植前对比有显著差异(pO．001)，至第90天时有所升高；但7 天、30天、90天的血糖值与正常组对比均无差异(pO．05)。胰岛 素分泌于一周时升高，而后下降，均未达到正常值水平。与移植前 对比有显著差异(pO．001)。7天和30天胰岛素分泌量值与正常组 对比有差异(pO．05)；90天胰岛素分泌量值与正常组对比有显著 结论： 差异(pO．01)。微囊移植后对血糖及胰岛素分泌无影响。 糖尿病大鼠腹腔内移植微囊化香猪胰岛，可以存活并发挥其生物作 用。提示成年香猪是可用的异种胰岛移植供体。而胰岛素分泌在受 体中的作用机制还待探讨。 [关键词] 糖尿病： 疾病模型； 异种移植； 微囊 ABSTRCT 1．The of and of THESIS purificationpig separation experiments islet pancreas ofadult and