CⅡTA基因短发夹RNA表达载体对MHC-Ⅱ基因表达的抑制作用.pdfVIP

C ⅡTA 基因短发夹RNA 表达载体对MHC- Ⅱ基因表 达的抑制作用1 刘刚，章志翔，何向辉，赵娜，朱理玮 天津医科大学总医院普通外科，天津（300052 ） E-mail ：lg1059@ 摘 要：目的：探讨大鼠C ⅡTA 基因的shRNA 质粒载体对于C ⅡTA 基因和MHC- Ⅱ基因 表达的抑制效果。方法：构建针对大鼠C ⅡTA 基因的三个shRNA 质粒载体，脂质体法体外 转染大鼠树突状细胞(DC)，门静脉注射法体内转染大鼠脾脏，采用荧光实时定量PCR 技术 检测转染后DC 和脾脏的C ⅡTA 及MHC Ⅱ的mRNA 表达水平变化，流式细胞术检测转染 后MHC- Ⅱ的蛋白表达变化。结果：成功构建C ⅡTA-shRNA 质粒载体；与对照组相比，三 个 shRNA 质粒转染组的 DC 和脾脏转染后的 C ⅡTA 和 MHC- Ⅱ的 mRNA 表达水平及 MHC- Ⅱ抗原表达水平均显著性减低（P ＜