镉对水稻幼苗根系细胞膜电位影响.pptVIP

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镉对水稻幼苗根系细胞膜电位的影响 镉对水稻幼苗根系细胞膜电位的影响 基本知识 实验材料 实验方法 实验结果与分析 基本介绍 细胞膜电位 :细胞膜电压,是指细胞膜内外之间的电势差。 静息电位:指细胞在没有受到外来刺激时,细胞膜内、外侧所存在的电位差 去极化:静息电位减小甚至消失的过程。 超射值:膜内电位由零到反极化顶点的数值。 复极化:去极化、反极化后恢复到极化的过程。 关于本实验 本研究以对Cd 敏感性不同的两个水稻品种作为试验材料,根据Cd 胁迫条件下的钾外流情况讨论了Cd 对水稻根细胞膜透性的影响,旨在通过研究Cd 对水稻根细胞膜性质的影响为研究Cd 对作物吸收矿质元素的影响机理提供理论依据,进而为Cd 污染条件下的水稻生产提供参考。 实验材料 供试材料为淮稻11 号(粳稻)和扬稻6 号(籼稻)。种子经1%NaClO 灭菌,蒸馏水洗净后在0.2 mmo1/LCaSO4 溶液中浸泡24 h,置于培养箱中35 ℃暗中催芽。种子露白后转入营养液中,置于人工气候室内生长,每日光照14 h,光强250~300 μmol·m-2·s-1,温度(28±1)℃,相对湿度80%。 营养液组成为:1.0 mmol· L-1 NH4+、0.5 mmol/L NO3-、0.2 mmol/L H2PO4- 、 1.0Mmol/L K+、 0.5 mmol/L Mg2+、 10 μmol/L Mn2+、0.1Μmol/L Mo7O 24 6- 、20 μmol/L BO3 3 - 、0.15 μmol/L Zn2+、0.15 μmol/L Cu2+、35μmol/LFe2+、1.0 mmol/LSiO32- 每日早晚用稀HCl 和稀NaOH 调节营养液pH至6.0,每3 d 更换营养液。秧苗在营养液中生长6 周后,进行膜电位测定 实验方法 膜电位测定 将水稻幼苗的一条根固定在体积约为1.0 mL 的 有机玻璃浴池内(图1),以2 mL·min-1 的速度灌流入含5 mmol·L-1 MES(2-吗啉乙磺酸 ),0.5 mmol·L-1 CaCl2 和0.05 mmol·L-1 KCl 的基础缓冲液(以NaOH 调节至pH6.0)。在显微镜,下借助于微操纵仪,将测量电极的针尖轻轻插入距根尖10~20 mm 处的表皮细胞,记录膜电位的变化。 实验方法 膜电位测定 在获得稳定的静息电位后,将基础缓冲液更换为含0.1 或1.0 mmol·L-1 Cd2+的处理缓冲液,记录膜电位的变化。 处理液用基础缓冲液配制,含有相同浓度的MES、K+和Ca2+,Cd2+以CdCl2 的形式供给。每个处理用不同的水稻根重复8 次以上。 实验方法 膜电位测定 由于测量部位处于生长比较活跃的根尖,很难将 微电极尖端较长时间地维持在同一细胞中,因此在考察Cd2+对膜电位长时间的影响时,先将秧苗根系浸于含1.0 mmo1·L-1 Cd2+的处理缓冲液中,分别处理0.5、1、2、3、4、5、6、8、10、12 h 后再进行膜电位的测定。测定时灌流入含1.0 mmol·L-1 Cd2+的处理缓冲液,记录 稳定的膜电位值。每个处理用不同的水稻根重复12次以上。 结果与分析 Cd 对水稻幼苗根表皮细胞膜电位的影响根据秧苗根表皮细胞跨膜电位的试验记录曲线可以发现,当向测量槽内灌流入Cd2+时,膜电位在几分钟内即发生快速强烈的去极化(图2),且扬稻6 号的去极化程度显著高于淮稻11 号(表1)。 当灌流入Cd2+浓度为0.1 mmol·L-1 的处理缓冲液时,淮稻11 号在发生极化之后,大多在随后的30 min 内发生了缓慢的复极化;而扬稻6 号仅偶尔出现复极化现象,此时若再灌流入不含Cd2+的基础缓冲液,大多可恢复到处理之前的极化状态。当灌流入Cd2+为1.0 mmol·L-1的处理缓冲液时,两个水稻品种在30 min 内都维持着去极化状态,此时即使灌流入不含Cd2+的基础缓冲液,也仅能发生部分复极化。 结果与分析 就更长时间(0~12 h)来看,在1.0 mmol·L-1 Cd2+处理条件下,膜电位在经过了去极化阶段后仍有缓慢的恢复,淮稻11 号在处理6~8 h 后已接近初始的膜电位值,而扬稻6 号在处理12 h 后仍不能恢复到处 理前的水平(图3)。 谢谢 * * 中国大米污染分布 * * *

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