组织学绪论2课件.pptVIP

常用的特殊光学显微镜技术: ⒈荧光显微镜技术 荧光显微镜(fluorescence microscope)以紫外线为光源，能够激发细胞、内的荧光物质或者荧光染料发出荧光。适用于观察细胞、组织内各种自发荧光物质，也可以观察光素或者荧光染料标记的细胞、组织结构。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FITC)、碘化丙啶(PI)等。 ⒉相差显微镜技术 相差显微镜(phase contrast microscope)可将活细胞内各种结构对光产不同折射(相位差)转换为明暗差别(振幅差)，从而使观察对象结构反差明显，适用于观察活细胞未经染色的形态结构；而倒置相差显微镜可观察生长在培养瓶活细胞，并进行摄片及录像以记录活细胞的增殖、分裂和运动等行为。 激光扫描共聚焦显微镜技术 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)以激光作为激发光，通过计算机控制的扫描装置．获得细胞和组织内部微细结构的荧光图像，能观察细胞形态和细胞内各种成分的细微变化，并可动态检测细胞内各种离子、 pH、膜电位等生理信号，广泛地应用于组织和细胞的形态学、分子生物学、生物化学、神经生物学、生理学、药理学和遗传学等领域研究。 ⒈透射电镜技术 透射电镜(transmission electron microscope，TEM)是通过电子枪发射的电子束穿透观察样品后，经电磁场的聚合放大并在荧光屏上显像。由于电子束在不同的电压下(一般为50～100 kV)产生不同的短波长，所以电镜的分辨率可达0.1～0.2 nm，放大倍数可以从数千倍到几百万倍。 (二) 电 镜 技 术 透射电镜样品的制备主要过程： 取材: 新鲜,组织块(大小以不超过lmm3为宜); 固定: 用戊二醛和锇酸依次固定; 包埋: 树脂； 切片: 超薄切片（厚度为25～80 nm）； 染色: 醋酸铀和柠檬酸铅； 电镜下观察： 电镜下所看到的结构通常称超微结构。 荧光屏上呈较黑暗的图像，称电子密度高；反之图像则较明亮，称电子密度低。 ⒈透射电镜术（transmission electron microscopy, TEM） 用于观察组织细胞的超微结构。 透射电镜样品的制备主要过程： 戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切片（50 －80nm 厚）→电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅） 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色） 用透射电子显镜观察超薄切片标本 电镜分辨率约 为0.1～0.2nm 浆 细 胞 电子密度高/低 （LM）结构 （EM）结构 * 华中科技大学同济医学院 组织学与胚胎学教研室 上篇 组织学 第1章　组 织 学 绪 论 一、组织学的内容和意义 组织学（histology） 是研究机体微细结构及其相关功能的科学,从组织、细胞、亚细胞和分子水平上对机体进行研究。 心脏（器官） → 心肌（组织） → 心肌细胞（细胞） 心肌细胞 → 肌原纤维（亚细胞） → 肌节 → 肌丝（分子） 组织学的内容：细胞、组织、器官和系统。 细胞(cell) 是机体结构与功能的基本单位，由细胞膜、细胞质和细胞核构成。 细胞的形态、大小适应其功能。 组织(tissue) 由细胞群和细胞外基质构成。　　　　　 人体基本组织： 上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织。 细胞外基质 由细胞所产生，包括纤维、基质和组织液。 基 本 组 织 (光镜结构) 上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织 组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官； 若干功能相关的器官构成系统 。 意义： ※ 促进了生理学的进步 ※ 是病理学的基础 ※ 掌握组织的基本知识和技能，是学好生理学和病理学的前提。 二、组织学发展简史和当代组织学 ⒈光学显微镜的发明与细胞概念的提出 光学显微镜（light microscope LM)是16 世纪末荷兰人（Janssen兄弟）发明的。 1665年英国人胡克用自制的显微镜观察了软木塞薄片，将一层薄壁围成的小室称作“细胞”。 ⒉细胞学说的提出及组织学的建立 施万（Schwann 1838 ）、施莱登（1839）提出“细胞学说” ：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生。 1858年，德国人（virshow）提出了细胞病理学说，认为细胞损害是一切疾病的基础，使得细胞学说愈加完善。