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RNA的合成.ppt
以DNA为模板合成RNA(转录) ——正常细胞 以RNA为模板合成RNA(复制) ——某些RNA病毒和特定组织 1、转录的概念: 在DNA指导的RNA聚合酶催化下,生物体以DNA的一条链为模板,按照碱基配对原则,合成一条与DNA链的一定区段互补的RNA链,这个过程称为转录。 2、特点 1)基因的转录是局部转录, 2)RNA的合成(基因转录)是不对称转录, 3)基因的转录有选择性。 二、RNA聚合酶 1、?反应式: n1ATP DNA指导的RNA聚合酶 n2GTP RNA + n3CTP DNA、 Mg2+、Mn 前体 n4UTP (n1+n2+n3+n4)PPi 反应特点: 1)底物:NTP ,适当Mg2+、Mn2+ 2)模板指导 3)反应不需引物,直接在模板上合成RNA 4)合成方向5,→3,(RNA链的延长方向) 2、?大肠杆菌RNA聚合酶组成与功能 大肠杆菌RNA聚合酶全酶α2ββ,σ 核心酶α2ββ, σ因子 使已开始合成的RNA聚合延长 识别启动子部位, 起始作 3、真核细胞RNA聚合酶组成与功能 RNA聚合酶Ⅰ(A)核仁——rRNA前体 Ⅱ(B)核质——mRNA前体 Ⅲ(C)核质——tRNA和5sRNA前体 三、启动子和转录因子 启动子(promoter): 指RNA聚合酶识别,结合和开始转录的一段DNA序列。 Promoter确定方法: 足迹法(footprint)+DNA测序法 转录起点 5/ 负(模) 3/ 上游(—) 下游(+) 3/ -1 +1 正(编) 5/ mRNA 互补于负链 真核生物的启动子 1)? -25bp~-30bp TATA box DNA解链开始转录位置 2)? CAAT box -75左右,与RNA聚合酶结合有关 3)? 更上游 GC box转录因子结合其上 四、终止子和终止因子 1、? 终止子(terminator): 提供转录停止信号的DNA序列称终止子。 终止因子(terminator factors): 协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子(蛋白质)。如ρ因子 终止子的特点(原核生物) 1)在终止点之前均有一个廻文结构 →RNA可形成发夹结构 2)E.coli的两类终止子: 不依赖于ρ的终止子 依赖于ρ的终止子 五、转录的基本过程(大肠杆菌) 1、识别阶段 RNA聚合酶(全酶)通过σ亚基发现其识别位点后,首先与-35区序列结合形成一个封闭的启动子复合体 2、转录起始:形成一个聚合酶-DNA-新生RNA的三元复合物 第二节 RNA的转录后加工 一、原核生物中RNA的加工1、? rRNA前体的加工 1)????? 特定位点进行甲基化,产生甲基化修饰成分 2)????? 核酸酶(核酸内切酶)切除(裁切)间隔区 1、?
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