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放线菌形态及结构的观察 姓名：贾晓霖 学号：201000140032 班级：生科10.1 同组人员：李江湲 程子修 洪钧烨 摘要：配制高氏I号培养基用来培养青色链霉菌和弗式链霉菌，本实验运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态。更直观的了解，基内菌丝、气生菌丝以及气生菌丝分化而成的孢子丝以及孢子。 关键词：青色链霉菌Streptomyces glaucus）、弗氏链霉菌Streptomyces microflavus）、高氏I号培养基、插片法 前言：放线菌（actinomycetes）主要以孢子繁殖至今发现的五六十属与人类的关系极为密切根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示玻璃纸法印片法链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌青色链霉菌(Streptomyces glaucus)弗氏链霉菌(S. glaucus).pH 试纸，棉塞，牛皮纸，记号笔，载玻片，盖玻片（3包 10个/包），培养皿（1包 10个/包），移液管，接种环，镊子2把 三、实验方法 一、高氏I号培养基的制备 1、称量和溶解。 2、按配方先称取可溶性溶粉、放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉尽量溶解，再加入沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶解。 3、称取其他各成分依次溶解。由于条件限制，对于微量成分FeSO4·7H2O，直接用分析天平称量，加入即可。 4、待所有药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积，进行pH 调节到7.2～7.4。 5、制平板培养基。 6、材料灭菌。将所配溶液装在三角烧瓶中并加棉塞，棉塞外包一层牛皮纸，并用麻绳捆好，用记号笔标记组号。取十个培养基，用牛皮纸包好，用记号笔标记大小面。同理盖玻片也用牛皮纸包好，再在盖玻片上加盖一层牛皮纸纸，用牛皮纸包好后，用记号笔标记，镊子也包好一起灭菌。将上述物品放入密封的加压灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌121℃、20分钟。 7、在无菌操作箱中的酒精灯旁，将三角烧杯中高氏I号培养基液分装到6个培养皿中，平放凝固。 二、插片法进行链霉菌的观察 1、接种 无菌操作分别由青色链霉菌弗氏链霉菌45°角插入平板琼脂并与接种线垂直，每个培养基在不同的位置插入三个盖玻片。 3、培养 将平板倒置，于28℃培养。（如果担心玻片插得不够牢靠，也可以正面培养） 4、镜检 用镊子小心取出盖玻片，用纸擦干净一面，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜镜检观察，并记录观察现象。 3.结果分析 一、结果 1、显微镜下链霉菌的形态特征图 弗式链霉菌（10×40倍） 青色链霉菌（10×40倍） 手绘区域 弗氏链霉菌 青色链霉菌 2、放线菌的菌落特征 1、青色链霉菌：孢子丝螺旋状，孢子卵圆形、长圆形，表面光滑弗氏链霉菌孢子卵圆形、长圆形、柱形，表面光滑，放线菌的细胞有基内菌丝和气生菌丝的分化，气生菌丝到成熟时又会分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子，这些气生菌丝或孢子丝伸展在空气中，菌丝间一般都不存在毛细管水。这就使放线菌获得其特有的与细菌不同的菌落特征：干燥、不透明，表面呈紧密的丝绒状菌落和培养基的连接紧密，难以挑取菌落镜检时，宜用略暗光线先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观 5、链霉菌的孢子特征：孢子的形状多样，有球状、椭圆状、杆状、圆柱状、瓜子状、梭状和半月状等。孢子的颜色十分丰富，且与其表面的纹饰有关。孢子表面的纹饰在电子显微镜下清晰可见，除表面光滑者外，还有褶皱状、疣状、刺状、发状和鳞片状。刺又有粗细、大小、长短和疏密之分。目前发现，凡直或波曲的孢子丝，都产生表面光滑的孢子（尚未发现带刺或毛发状的），若孢子丝为螺旋状的，则其孢子表面会因种而异，有光滑、刺状或毛发状的。基内菌丝比较亮气生菌丝比较黑