农杆菌介导的转化所用基本培养基配方.docVIP

农杆菌介导的转化所用基本培养基配方 一、NB培养基配方（基本培养基） N6大量： （mg/l） 母液：10X，1L（mg） 硝酸钾KNO3 硫酸氨（NH4）2SO4 磷酸二氢钾KH2PO4 硫酸镁MgSO4·7H2O 氯化钙CaCl2·2H2O 2830 463 400 185 166 28300 4630 4000 1850 1660 B5微量： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 硼酸H3BO4 硫酸锰MnSO4·H2O 硫酸锌ZnSO4·7H2O 碘化钾KI 钼酸钠Na2MoO4·2H2O 硫酸铜CuSO4·5H2O 氯化钴CoCl2·6H2O 3 7.58 2 0.75 0.25 0.025 0.025 300 758 200 75 25 2.5 2.5 铁盐： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 硫酸亚铁FeSO4·7H2O 乙二胺四乙酸二钠Na2EDTA 27.8 37.3 2780 3730 肌醇： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 肌醇Myo-inositol 100 10000 有机成分： （mg/l） 母液：50X，1L（mg） 盐酸硫胺素ThiamineHCl 盐酸吡哆醇PyridoxineHCl 尼克酸Niacin 水解酪蛋白Casamino acids 谷氨酰胺Glutam 脯氨酸Proline ine 甘氨酸Glycine 10 1 1 300 250 500 2 500 50 50 15000 12500 25000 100 蔗糖Sucrose 30000mg/l 琼脂Phytagel 2400mg/l pH 5.8-5.9 注意：有机成分不能高压灭菌，须用滤器抽滤，分装后-20℃保存 二、AAM培养基配方 大量： （mg/l） 母液：10X，1L（mg） 磷酸二氢钾KH2PO4 硫酸镁MgSO4·7H2O 氯化钾KCl 氯化钙CaCl2·2H2O 170 370 2940 440 1700 3700 29400 4400 微量： （mg/l） 母液：100X，100ml（mg） 硫酸锰MnSO4·H2O 钼酸钠Na2MoO4·2H2O 硼酸H3BO4 硫酸锌ZnSO4·7H2O 碘化钾KI 硫酸铜CuSO4·5H2O 氯化钴CoCl2·6H2O 7.58 0.25 3 2 0.75 0.0387 0.025 758 25 300 200 75 3.87 2.5 铁盐： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 硫酸亚铁FeSO4·7H2O 乙二胺四乙酸二钠Na2EDTA 27.8 37.3 2780 3730 肌醇： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 肌醇Myo-inositol 100 10000 维生素： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 盐酸硫胺素ThiamineHCl 盐酸吡哆醇PyridoxineHCl 尼克酸Niacin 0.5 0.5 0.5 50 50 50 氨基酸： （mg/l） 甘氨酸Glycine 精氨酸Arginine 谷氨酰胺Glutamine 7.5 174 876 水解酪蛋白Casamino acids 500mg/l 乙酰丁香酮Acetosgringone 100μΜ 葡萄糖Glucose 68500mg/l 蔗糖Sucrose 30000mg/l pH 5.2 注意：AAM培养基不能高压灭菌，须用滤器抽滤，分装后-20℃保存 三、YEB固体 (pH 7.0) 酵母提取物 蛋白胨 牛肉膏 蔗糖 硫酸镁 添加： Kan　　50 mg/L Rif　　50 mg/L 1.0g／Ｌ 5.0g／Ｌ 5.0g／Ｌ 5.0g／Ｌ 0.5g／Ｌ 四、LB固体 (pH 7.0-7.2) 酵母提取物 蛋白胨 NaCl 添加： Kan　　50 mg/L Rif　　50 mg/L 5g／Ｌ 10g／Ｌ 10g／Ｌ 五、MS培养基配方 大量： （mg/l） 母液：20X，1L（mg） 硝酸铵NH4NO3 硝酸钾KNO3 磷酸二氢钾KH2PO4 硫酸镁MgSO4·7H2O 氯化钙CaCl2·2H2O 1650 1900 170 370 440 33000 38000 3400 7400 8800 微量： （mg/l） 母液：100X，1L（mg） 硫酸锰MnSO4·4H2O 硫酸锌ZnSO4·7H2O 硼酸H3BO4 碘化钾KI 钼酸钠Na2MoO4·2H2O