温度PH对酶活力的影响.docVIP

二．教案与讲稿 一、教案 课程名称 生物化学实验 授课专业和班级 2005级临床本科及麻醉本科 授课内容 温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性的影响 授课学时 4学时 授课地点 分析实验室 日期 2006.10.13 节次 6、7、8、9节 教学目的 掌握温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理；唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；熟悉各种仪器的使用和操作。 教学重点 温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理，怎样设计合理的实验方案来验证温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响。 教学难点 让学生理解温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理 教具 黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。 教学方法 小班讲课 教学过程 再次强调实验室规则要求，对上次的实验进行评价和总结 10分钟 简述实验过程，并对实验所用的实验仪器作介绍 5分钟 阐述温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原 理，并对实验的结果进行预测。 35分钟 设计合理的实验方案并进行操作（学生） 100分钟 实验结果观察与讨论 10分钟 参考书籍 （1）张文峰，黄林邦主编《分析与检测实验技术》（江西高校出版社） （2）周爱儒主编《生物化学》（第六版，人民卫生出版社） 思考题或/及作业 （1）影响本次实验的因素？ （2）怎样才能克服影响实验结果的因素？ 课后总结 二、讲稿 [实验目的] 1: 掌握温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性影响的基本原理 2: 熟悉各种仪器的使用和基本操作 [实验原理] 唾液淀汾酶所催化的反应为： 淀汾——糊精（不彻底产物）——麦芽糖（彻底产物）。 碘液显色反应：碘液本身为棕色，与淀粉反应显深蓝色，与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红等色，与麦芽糖不呈色。 1.温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性的影响情况 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、失活； 2.pH：酶活性最大时的环境pH为最适pH。pH不仅会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶变性、失活。 3.激活剂与抑制剂：激活剂能增加酶的活性，而抑制剂则会抑制酶的活性，Cl-为唾液淀粉酶的促进剂，而Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。 [操作步骤] 收集唾液（自来水漱口、收集唾液5ml于小烧杯、蒸馏水稀释10倍、小漏斗棉花团过滤、置37度水浴箱中保温，备用。） 取试管10支，分三组按下表操作： A．温度组 A1管 A2管 A3管 唾液（2ml） 冰水浴10分钟 37度水浴10分钟 100度沸水浴10分钟 1%淀粉（含NaCl） 20d 20d 20d 冰水浴15分钟 37℃水浴15分钟 100℃水浴15分钟 碘液 2d 2d 2d 显色 深棕色 浅棕色 蓝色 B．PH值组 B1管 B2管 B3管 磷酸盐缓冲液（2ml） PH值5.0 PH值6.8 PH值8.0 1%淀粉（含NaCl） 2ml 2ml 2ml 唾液 10d 10d 10d 摇匀，立即置37度水浴箱中保温，每隔1分钟从2号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻，分别向3管中加入0.3%碘液2滴，观察颜色变化。 显色 浅蓝色 浅棕色 浅蓝色 C．激活剂、抑制剂组 C1管 C2管 C3管 C4管 1%淀粉（不含NaCl） 20d 20d 20d 20d 溶液（2d） 1%NaCl 1%CuSO4 1%Na2SO4 蒸馏水 唾液 10d 10d 10d 10d 摇匀，立即置37度水浴箱中保温，每隔2分钟从1号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻，分别向4管中加入0.3%碘液2滴，观察颜色变化。 显色 浅棕 深蓝 紫、红或浅蓝 紫、红或浅蓝 结果与分析：（学生） 讨论：（学生）