生理实验设计.docVIP

不同浓度的钾离子对 在体蛙心活动的影响  不同浓度的钾离子对在体蛙心活动的影响 1、实验的原理和目的： 心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里才能维持，一旦适宜的理化环境被破坏或干扰，心脏活动就会受到影响。心脏受自主神经系统的双重支配，心交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力增强，传到增快，心率加快；而心迷走神经兴奋时，则释放乙酰胆碱，使心肌收缩力减弱，心率减慢。正常情况下，由窦房结发出的兴奋按一定的途径和时程依次传向心房和心室，引起整个心脏的兴奋。心脏各部分在兴奋过程中出现的生物电活动，可通过心脏周围的导电组织和体液传到体表。此时，对心跳曲线进行测量观察，可观察心脏的活动情况。同时，如果将测量电极置于体表的一定部位，即可引导出心脏兴奋过程中所发生的电变化，这种电变化经一定处理后并记录到特殊的记录纸上，便成为心电图。钾离子参与心肌细胞的复极化和自律细胞的4期自动去极化过程。不同浓度的钾离子对心脏的收缩活动会产生不同的影响，通过心电图可以表现出来，加之心跳曲线的测量，更加具体、直观。 本实验目的在于:①研究不同浓度的钾离子对蛙心动作电位及心电图的影响②了解在体器官的研究方法。 2、实验材料：蟾蜍 3、实验试剂：2%KCL溶液、4%KCL溶液、6%KCL溶液、8%KCL溶液、10%KCL溶液、生理盐水、标准任氏液 4、实验的仪器与设备：蛙类手术器械一套，生物信号采集处理系统，张力换能器，心电图机，铁支架，蛙心夹，静脉注射器、滴管，丝线。 5、实验方法： （1）动物模型制备：取蟾蜍一只，用探针破坏脑和脊髓后，将其仰卧固定于蛙板上。用镊子夹起皮肤，用手术剪将胸部剑突软骨下方皮肤剪出一个“V”字形切口，暴露出胸骨。用镊子夹住胸骨剑突下端，在肌肉层上剪出同样的“V”字形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨，并进一步把左右两侧胸骨完全剪掉，用眼科剪仔细剪掉心包膜，暴露心脏，在心室舒张期用蛙心夹夹住心尖约一毫米。 （2）仪器连接：用丝线将蛙心夹连至换能器的金属弹片上，调节连接线松紧适宜。张力换能器连至生物信号采集处理系统的输入口“通道1”。将一个电极夹在裸露的肌肉上，另一个电极连接蛙心夹。将心电图机肢体导联的四根引导电极去掉脚手用动脉夹将红、黄、绿、黑四根电极分别对应固定在右、左前肢和左、右后肢的蛙钉上。开启心电图。动态观察一段正常心跳曲线和心电图。 （3）实验步骤：分5个实验组及1个对照组，每组随机分5只蟾蜍。实验组经蟾蜍颌淋巴囊依次注射2%KCL溶液、4%KCL溶液、6%KCL溶液、8%KCL溶液、10%KCL溶液，注射量均为0.5ml，分别观察并记录其所对应的心跳曲线和心电图。对照组蟾蜍注射等量生理盐水，观察并记录其心跳曲线和心电图。 6、技术路线： 动物模型制备→仪器连接→注射→观察现象 7、预期结果： 实验组注射2%、4%KCL溶液的蟾蜍，其心跳曲线较正常的心跳曲线，心率稍有加快，心肌兴奋性增强，收缩性增强，P R间期缩短，ORs波群升高变窄。实验组注射6%KCL溶液的蟾蜍，其心跳曲线较正常的心跳曲线，心率略有加快，心肌兴奋性增强，收缩性增强，P R间期缩短，ORs波群升高变窄。实验组注射8%、10%KCL溶液的蟾蜍，其心跳曲线较正常的心跳曲线，心率减慢，心肌兴奋性下降，收缩性下降，P R间期延长，ORs波群增宽变低，T波明显高尖，部分动物T波变低或消失。对照组注射生理盐水的蟾蜍，其心跳曲线和心电图与正常的无明显变化。 8、分析及注意事项： 分析：细胞外钾离子浓度升高时，细胞膜内、外钾离子浓度差变小，钾离子外流所需的浓度势能减小，因而在静息时经Ik1通道流出的钾离子减少，导致细胞去极化。又因Ik1通道与复极化有关，细胞外钾离子浓度升高时，Ik1通道对钾离子通透性增高，钾离子外流加速，复极化加快，动作电位时程缩短，T波高尖。 钾离子浓度轻度升高时，心肌细胞静息电位减小，和阈电位的距离变小，兴奋性上升；钾离子浓度重度升高时，静息电位严重变小，抑制钙离子在复极化2期内流，故复极化延长。当静息电位小于-40mv时，快钠通道将全部失活，快反应细胞不能发生0期去极化，因而不能产生动作电位，出现心脏骤停。 另，细胞外高钾时，可使浦肯野细胞的最大舒张电位的负值减小，从而使If通道的激活程度降低，使浦肯野细胞的自律性降低。 注意事项：1．观察蛙心跳曲线和心电图时，可依次开启仪器，并调换开启的顺序，然后同时开启，观察得到的曲线是否相同，作进一步分析； 2．血清钾溶液浓度高低并不一定与心电图改变平行一致，还与实验对象是否同时存在其他电解质紊乱及酸碱平衡是否正常有关； 3．记录的各个导联心电图波形可以粗略分为反映心房兴奋去极化的P波和反映心室兴奋的波群，后者又可以分为反映心室去极化的波(QRS波群)和反映心室复极化的波（T波）。心