Ampicillin氨苄青霉素溶液、储存液的配制方法.docVIP

Ampicillin 氨苄青霉素干粉 氨苄青霉素溶液（储存液）的配制方法 ----------------------------------------------------- 华越洋 ★华越洋氨苄青霉素溶液：为浓度为50mg/ml的氨苄青霉素溶液，用于分子生物学和组织培养（防止微生物污染和抗菌性筛选） ★原理：为能使细菌细胞内层的transpeptidase（转肽酶）失活从而抑制细菌细胞壁的合成。 抗体机制：抗性基因bla能特异性表达外周质酶，该酶可切割氨苄青霉素的β-内酰胺环从而使之失活。 ★保存：-20℃保存 华越洋氨苄青霉素干粉简介： 华越洋氨苄青霉素为白色晶体或粉末，分子式是C16H19N3O4S,分子量为349.41。溶于稀酸和稀碱，微溶于水和甲醇，几乎不溶于氯仿、96%乙醇、乙醚、乙酸乙酯和固定油。无臭，味苦。抗革兰氏阳性及阴性菌，用于分子生物学和组织培养（防止微生物污染和抗性筛选）。 氨苄青霉素时常被用于分子生物学上，作为细菌（如大肠杆菌）吸收基因（如质粒）的测试。测试会将一组基因，连同已编码抗氨苄青霉素的基因插入细菌中。该细菌会被放于充满氨苄青霉素的环境下培育，直至成功制造卞所需的基因。 氨苄青霉素是殺菌性的抗生素。能滲透革蘭氏陽性菌及部份革蘭氏陰性菌。經由結合在細菌細胞壁上的青霉素結合蛋白（penicillin-binding proteins，PBPs），阻礙細菌合成細胞壁的第三及最後階段，最終引致細胞裂解。 分子结构： ★氨苄青霉素溶液（储存液）的配制方法 目的： 配制500ml的50mg/ml氨苄青霉素贮存液。实验用品的准备： 足够量的2ml的EP管，滤头（内装有两层滤膜）、两个50ml的离心管、注射器，以上用品除注射器外都要进行高压灭菌；注意：（1）滤头灭菌前，安装滤膜时，不要旋得太紧，待灭菌后使用前于超净台上用力旋紧，以防漏液。（2）EP管，滤头、两个50ml的离心管灭菌后要进行烘干。抗生素溶液的配制：（1）称取25g的氨苄青霉素粉末，倒入盛有200—300ml去离子水的烧杯中，最好在烧杯上面盖个东西（封口膜或者干净的滤纸），以防止粉末飘出，轻摇烧杯，可见氨苄青霉素粉末迅速溶解。（2）待氨苄青霉素粉末溶解完，加去离子水至500ml，稍等几分钟让粉末完全溶解，以免过滤时堵塞滤膜。氨苄青霉素溶液的过滤除菌及分装：（1）取出旧报纸包裹的滤头，用力旋紧，备用。（2）用注射器吸取配制好的溶液，然后把滤头安在注射器上，缓缓推动注射器活塞，把溶液经滤膜推至50ml的离心管中，直至把两个离心管都注满。注意：动作用缓和，一只手拿着活塞，一只手拿着滤头，使滤出液出口正对着离心管，还要防止染菌。（3）把50ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到2ml的EP管中。（4）重复（2）、（3）直至把500ml溶液分装完毕。（5）在EP管上做好标记，包括名称、日期等。（6）把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存