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广西三七皂苷类成分含量的分析_药学论文 广西三七皂苷类成分含量的分析_药学论文 作者：杨海菊 孔德鑫 黄万清 冯秀芳 黄荣韶 【摘要】 　　目的研究广西三七不同产地、不同部位的皂苷含量特征。方法利用香草醛-高氯酸比色法测定三七中总皂苷含量，以高效液相色谱（HPLC）法测定三七中人参皂苷Rg1，Rb1，Re和三七皂苷R1含量。结果广西靖西县不同产地三七样品的总皂苷及单体皂苷含量存在差异；不同部位间皂苷含量的差异达到极显著水平，以根茎的最高，主根次之；同一样品中，各单体皂苷含量以人参皂苷Rg1最高，人参皂苷Re最低，不同样品中各单体皂苷间比值存在差异。结论广西靖西县各地三七质量存在差异，药材中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1三者含量之和符合2005版《中国药典》规定。 【关键词】 三七 总皂苷 人参皂苷 三七皂苷 　　三七Panax notoginseng（Burk）F.H.Chen为五加科植物，是我国传统名贵中药材，含皂苷、黄酮、氨基酸、多糖、三七素等多种活性成分，有散淤止血、消肿定痛之功效，用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外伤出血、胸腹刺痛、跌扑肿痛等［1］。目前市场上三七主要来源于云南，并且国外也具有十分巨大的市场潜力。随着人们生活水平的提高，对三七的需求量不断增加［2］。在保证三七稳产优质的条件下，开辟新的种植区域是满足三七需求的重要途径。广西作为三七的原产地，曾经也是主产地［3］。凭借优越地理条件和长期累积的经验，在广西扩大三七的种植面积是可行的。刘华钢等［4］也报道了广西三七含有较高人参皂苷Rg1，Rb1，Re和三七皂苷R1含量。广西政府已将三七纳入广西靖西等县鼓励种植的中药材之一。 　　三七不同部位皂苷含量不同，三七主根、根茎和支根中总皂苷含量差异明显［5］，广西三七茎基和须根的主要单体皂苷含量具有差异，且同一部位不同单体皂苷含量差异较大［6］。药理研究［7］表明，各单体皂苷的药理作用不同，相互间的含量比值的差异对三七药材质量有重要影响。因此，本文在前人研究的基础上，探索广西三七不同产地、不同入药部位的皂苷含量变化规律以及各单体皂苷在药材中的变化,为进一步研究广西三七质量奠定基础。 　　1 器材 　　1.1 仪器FZ102型微型植物粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），KQ-250DE型数显超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），Ｕ-1206紫外可见分光光度计（日本岛津公司），U3000高效液相色谱仪（美国戴安公司）。 　　1.2 试剂人参皂苷Rg1(供含量测定用，批号110703-200424)、人参皂苷Re(供含量测定用，批号110754-200421)、人参皂苷Rb1(供含量测定用，批号110704-200420)、三七皂苷R1(供含量测定用，批号110745-200415)，均由中国药品生物制品检定所提供。 　　乙腈和甲醇（美国Fiser公司，色谱纯），去离子重蒸水。 　　1.3 材料本研究中实验材料于2007-09采集靖西县新甲乡（JX1），武平镇（JX2），南坡乡（JX3）等地的三年生三七，经广西大学农学院植物科学系黄荣韶研究员鉴定为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen。 　　2 方法 　　2.1 三七总皂苷含量测定 　　2.1.1 三七总皂苷的提取参照马银海等［8］的提取法，采用超声波提取，提取温度45℃，以70％乙醇40 ml为提取溶剂，超声时间30 min，提取次数2次。合并提取液，70℃水浴浓缩至干，用15 ml蒸馏水溶解，以1 ml/min速度过预处理的AB-8大孔树脂柱，水洗至Molish反应阴性，用100 ml 70％乙醇以1.5 ml/ min 速度洗脱，至醋酸酐-浓硫酸反应阴性，收集洗脱液作为待测液。本实验在广西大学农学院植物生理实验室内进行。 　　2.1.2 标准曲线的制作 参照采用香草醛－高氯酸比色法［9］进行准确称定干燥至恒重的人参皂苷Rg1对照品4.9 mg，用甲醇溶解定溶于10 ml，精确量取0，40，80，160，200，300，400 μl置10 ml具塞试管中，水浴挥干溶剂，各加入新配制的5％的香草醛-冰醋酸溶液0.2 ml，高氯酸0.8 ml于60℃水浴恒温15 min，立即置于冰水中冷却5 min，加入冰醋酸5 ml摇匀，放置10 min，以试剂空白做参比于550 nm处测定吸光度，以吸光度(A)为横坐标，以对照品溶液加入的体积数(μg)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为Y=0.004 9X-0.008 4 (r=0.999 6)，对照品在19.6～196 μg范围内线性良好。 　　2.1.3 样品总皂苷含量测定按照标准曲线项下方法进行比色，测定吸光度，根据回归方程计算总皂苷含量。 　　2.2 三七单体的