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心肌急性梗死对骨髓及外周血心肌转录因子Nkx2-5的影响_医学论文 心肌急性梗死对骨髓及外周血心肌转录因子Nkx2-5的影响_医学论文 作者：徐志伟 徐夏红 董红燕 张中明 【关键词】 心肌梗死单核细胞Nkx2-5 　摘要 :目的 观察小鼠心肌梗死后，骨髓及外周血单核细胞心肌特异性转录因子Nkx2-5的变化。 方法 用大剂量异丙肾上腺素（10mg.kg）连续注射3天造成小鼠心肌急性缺血性梗死模型，第3天注射后30min，通过眼球摘除法取外周血，分离双后肢股骨、胫骨，冲洗骨髓腔得骨髓液，经密度梯度离心分离出骨髓及外周血单核细胞，正常组同心肌缺血梗死组。通过细胞Western blotting分析，比较正常组和心肌梗死组骨髓及外周血单核细胞中心肌特异性转录因子Nkx2-5的变化。 结果 正常骨髓单核细胞中存在Nkx2-5的表达，正常外周血单核细胞中Nkx2-5无表达心肌梗死后骨髓及外周血Nkx2-5表达均明显增加，同正常组比较有统计学意义，0.05。 结论 正常骨髓中无需培养或诱导即存在表达Nkx2-5的单核细胞，在心肌急性梗死后向外周血动员增加。 　　关键词 :心肌梗死单核细胞Nkx2-5 Abstract:Objective To examine the cardiac specific transcription factor Nkx2-5in the bone marrow and peripheral blood after myocardial infarction.Methods The mouse model of myocardial infarction was formed by sequential injection of large dose Iso（10mg.kg）for3days.Bone marrow and peripheral blood mononuclear cells（PBMC）were then collected from the model and the normal control mice to compare the expression of Nkx2-5in bone marrow and PBMC through Western blot-ting.Results Nkx2-5was found to be positive in normal bone marrow，but weak or negative in normal PBMC.The Nkx2-5expression became positive and obviously increased in both bone marrow and PBMC after myocardial infarction（0.05）.Conclusion The mononuclear cells，which express Nkx2-5，reside in bone marrow and are mobilized into peripheral blood after myocardial infarction，participating in repairing the infarction zone. Key words:myocardial infarctionmononuclear cellsNkx2-5 转录因子Nkx2-5是NK型同源盒基因家族Nkx2型的成员，是心脏祖（前体）细胞（cardiac pro-genitor cell，CPC）分化的最早期标志之一，具有显著性的心脏特异性表达的特点［1］ 。而CPC也被认为主要存在与心脏本身某些部位［2-3］ 。但近年有文献在核酸水平证实，在骨髓单核细胞群中存在CPC，无须培养或诱导即表达Nkx2-5，通过离体趋化性实验发现该群细胞可以向梗死心肌趋化［4］ 。本研究在异丙肾上腺素致小鼠心肌急性缺血梗死模型基础上，进一步在蛋白水平证实在骨髓单核细胞群中有Nkx2-5的表达，心肌梗死后外周血及骨髓Nkx2-5表达均明显上调。 1 材料和方法 1.1 动物 昆明种小鼠，雌雄不拘，体重（20±2）g，由徐州医学院实验动物中心提供。 1.2 试剂 羊抗Nkx2-5多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，碱性磷酸酶标记兔抗羊IgG购自北京中杉金桥生物公司，NBT.BCIP购自美国Sigma公司，盐酸异丙肾上腺素购自山东科峰制药有限公司，小鼠单核细胞分离液购自上海奇康生物科技有限公司，改良Western细胞裂解液购自上海西唐生物公司。 1.3 小鼠心肌梗死模型的制作 8只小鼠随机分为正常组和心肌梗死组，每组4只。心肌梗死组小鼠每只每