影响黄芪愈伤组织生长和黄芪黄酮合成的因素_药学论文.docVIP

影响黄芪愈伤组织生长和黄芪黄酮合成的因素_药学论文 影响黄芪愈伤组织生长和黄芪黄酮合成的因素_药学论文 【摘要】 　　目的 研究培养基成分和光照对黄芪愈伤组织生长和黄酮类化合物形成的影响。方法使用不同培养基并改变其中碳源、氮源、磷酸盐、钙盐的浓度，在黑暗和光照条件下进行黄芪愈伤组织培养，分光光度法检测愈伤组织中黄酮类化合物的含量。结果黄芪黄酮积累的最佳条件是（24±1）℃暗培养，培养基为MS基本培养基（附加0.5 mg·L-12,4-D和1.0 mg·L-16-BA），其中含有80 g·L-1蔗糖，NH+∶NO3-为1∶2（氮源总浓度为60mmol·L-1），1.5 mmol·L-1KH2PO4，1.496 mmol·L-1CaCl2。结论 蔗糖作为碳源最有利于黄芪愈伤组织生长和黄芪黄酮的生物合成。混合氮源有利于黄芪黄酮类化合物的合成。 【关键词】 膜荚黄芪； 愈伤组织； 黄芪黄酮； 培养基成分 　　Abstract：Objective：To study the effects of culture components and illumination on callus growth and synthesis of flavonoids of Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.Methods：Adjusted the concentration of carbon, nitrogen, phosphate and calcium in the culture solution, and kept the astragalus callus under dark or illumination, then detected the content of flavonoids by spectrophotometry .Results：The optimum condition of total flavonoids of astragalus accumulation was（24±1）℃ in the dark and the basic medium was Murashige and Skoog (MS)(plus 0.5 mg·L-12,4-D and 1.0 mg·L-16-BA) with 80 g·L-1sucrose, 1.5 mmol·L-1KH2PO4 and 1.496 mmol·L-1CaCl2, the proportion of NH+ and NO3- was 2∶1（nitrogen concentration is 60 mmol·L-1）.Conclusion：Sucrose, selected as source of carbon is more favored for the callus growth and the synthesis of saponins than glucose and maltose are. And mixed nitrate is favored for the synthesis of flavonoids compounds. 　　Key words：Astragalus membranaceus(Fisch.) Bge.； Callus； Total flavonoids of astragalus； Culture base component 　　黄芪是豆科黄芪属植物，全世界约二千多种，而我国分布有 278 种、2 亚种 35 变种 2 变型，南北各省区均产［1］。黄芪的根是重要的中草药，其中膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.和蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongho licus (Bge.) Hsiao是它的法定基原，为正品。研究表明黄酮是黄芪主要的活性成分之一，有广泛的药理作用，如清除自由基［2］、调节免疫、抗病毒、抑制血管内皮单层通透性增加等［3］。由于临床上对黄芪药材的需求量大增，黄芪野生资源破坏严重，产量日趋下降，有的产区种群已濒临灭绝［4］，而黄芪人工栽培存在生活周期长、存活率低、劳动强度大、农药残留超标、品质控制困难和有效成分较低等弊端，因此利用植物组织培养技术进行黄芪次级代谢产物的生产是解决目前供需矛盾的有效途径之一。 　　目前，对黄芪中黄酮类物质的研究主要集中在其药理作用上，对黄芩愈伤组织培养和黄酮类物质次生合成的研究尚少见报道。本文研究不同培养基成分对黄芪愈伤组织生长和黄酮类物质积累的影响，旨在为黄芪规模化生产黄酮类物质提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.