新型纳米仿生骨植入材料的生物相容性的初步研究_医学论文.docVIP

新型纳米仿生骨植入材料的生物相容性的初步研究_医学论文 新型纳米仿生骨植入材料的生物相容性的初步研究_医学论文 【摘要】 研究新型纳米仿生骨植入材料的生物相容性。 【方法】 采用骨髓基质细胞体外培养技术，通过ＭＴＴ法检测细胞相对增殖度，对材料的细胞毒性进行分级评价，并采用直接接触培养法，观察细胞在材料上的黏附与散布。 【结果】 材料的细胞毒性分级在０～１之间，骨髓基质细胞可紧密附着于材料表面，黏附生长，并有突起向材料的连通微孔内伸展。【结论】 新型纳米仿生骨植入材料对骨髓基质细胞无毒性作用，符合医用生物材料的安全要求。 【关键词】 仿生 复合材料 骨髓基质细胞 浸提液 生物相容性　　Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｎｏｖｅｌ Ｂｉｏｎｉｃ Ｓｃａｆｆｏｌｄ ｗｉｔｈ Ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ：Ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： 【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】 Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ｂｉｏｎｉｃ ｓｃａｆｆｏｌｄ ｗｉｔｈ ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ． 【Ｍｅｔｈｏｄｓ】 Ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａ ｃｅｌｌｓ （ＭＳＣ） ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｗｉｔｈ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ ｂｉｏｎｉｃ ｓｃａｆｆｏｌｄ． Ｃｅｌｌ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ （ＲＧＲ） ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ＭＴＴ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ａ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｆｏｒ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ． Ａｄｈｅｒｅｎｃｙ ａｎｄ ｓｐｒｅａｄｉｎｇ ｏｆ ＭＳＣｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｓｐｅｃｉｍｅｎ， ｕｓｉｎｇ ｄｉｒｅｃｔ ｃｏｎｔａｃｔ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ， ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ＳＥＭ． 【Ｒｅｓｕｌｔｓ】 Ｔｈｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ ｂｉｏｎｉｃ ｓｃａｆｆｏｌｄ ｒａｎｋｅｄ ｆｒｏｍ ｇｒａｄｅ ０ ｔｏ ｇｒａｄｅ １． ＭＳＣｓ ａｔｔａｃｈｅｄ ａｎｄ ｔｈｅｎ ａｄｈｅｒｅｄ ｆｉｒｍｌｙ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ， ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｅｄ ｒａｐｉｄｌｙ． Ｏｂｖｉｏｕｓ ｃｅｌｌ ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｉｅｓ ｓｔｒｅｔｃｈｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏ-ｐｏｒｅｓ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ． 【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】 Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ ｂｉｏｎｉｃ ｓｃａｆｆｏｌｄ ｈａｖｅ ｎｏ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｏ ＭＳＣｓ ａｎｄ ａｃｃｏｒｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｅｃｕｒｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ ｍｅｄｉｃａｌ ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｂｉｏｎｉｃ； ｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ； ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ； ｅｘｔｒａｃｔ ｌｉｑｕｉｄ； ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ 　　新型生物材料的生物相容性是影响其临床应用的主要因素，材料的孔径形状、大小以及孔隙率对引导细胞的附着、侵润和生长有着重要的作用［１， ２］，由于本实验材料需要植入体内与骨组织紧密接触，因此材料的骨细胞相容性是本研究的主要内容。本实验采用骨髓基质细胞的体外培养技术对新研制的新型纳米仿生骨植入材料（ＰＨＢＶ／ＳＧＢＧ）进行了初步评价，为今后进一步的研究提供实验依据。 　　１ 材料和方法 　　１．１ 材料与仪器 　　新型纳米仿生骨植入材料：３-羟基丁酸-ｃｏ-３-羟基戊酸共聚物／溶胶-凝胶生物活性玻璃 ［ｐｏｌｙ（３-ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅ-ｃｏ-３-ｈｙｄｒｏｘｙｖａｌｅｒａｔｅ）／ ｓｏｌ ｇｅｌ ｂｉｏａｃｔｉｖｅｇｌａｓｓ，ＰＨＢＶ／ＳＧＢＧ］（华南理工大学材料学研究所提供）。 　　主要仪器和设备：医用超净工作台、ＣＯ２培养箱、台式离心机、酶联免疫检测仪、倒置相差显微镜（中山三院中心实验室提供）；ＸＬ-３０／ＤＸ-４Ｉ扫描电镜／能谱分析仪（ＰＨＬＩＰＳ）（信息产业部电子五所国防科技重点实验室提供）。 　　主要试剂和材料：ＤＭＥＭ培养液（Ｇｂｉｃｏ）、胎牛血清（Ｓｉｇｍａ）、胰蛋白酶（ＰＡＡ）、ＭＴＴ（Ｇｂｉｃｏ）等（购自晶美生物制品公司）。 　　１．２ 实验方法 　　１．２．１ ＰＨＢＶ／ＳＧＢＧ材料的扫描电镜观察 常规干燥、表面喷金，进行ＳＥＭ检查，直接观察材料的结构、多孔形态、孔径和孔的贯通性。 　　１．２．２ ＰＨＢＶ／ＳＧＢＧ材料的孔隙率测定