新生鼠脑组织缺氧缺血再灌注损伤NFκB的表达及意义_医学论文.docVIP

新生鼠脑组织缺氧缺血再灌注损伤NFκB的表达及意义_医学论文 新生鼠脑组织缺氧缺血再灌注损伤NFκB的表达及意义_医学论文 作者：张定荣　张海鸿 车芬芳　徐书珍 【摘要】 目的 观察新生鼠窒息后缺氧缺血再灌注损伤不同时间脑组织NF动态变化，以探讨NF信号途径在新生儿窒息脑损伤中的作用。方法 出生7 d新生鼠随机分为对照组(A组)和窒息组(B组)制备新生鼠窒息模型，并于窒息后1、3、5和7 d取脑组织行石蜡切片。采用免疫组织化学方法检测窒息新生鼠脑组织NF活性表达水平，用苏木精伊红染色观察窒息后脑组织形态学变化。结果 B组脑组织NFB的表达较A组显著增强(0.05),以5 d时升高最明显并伴有神经细胞坏死及凋亡现象。结论 NF可能通过炎症反应机制介导窒息脑损伤过程。 【关键词】 NF窒息新生鼠缺氧缺血再灌注损伤 脑组织 　　【Abstract】 Objective To observe the activation of NFs to explore the effect of NFκB signal pathway on brain injury of newborn with asphyxia, so as to provide the experimental base for finding clinical treatment of asphyxia,in which NFκB is taken as the target.Methods newborn rats(7 days old)were randomly divided into control group (A) and asphyxia group (B).The model of asphyxia was induced in B group .Immunohistochemical method was used to detect the activity of NFκB P65 in the brain of the newborn rats,and hematoxylineosin staining was perform ed to observe the histological evidence of asphyxia in the brain.Results The activity of NFκB P65 was higher in group B than that in group A(0.05),increased to the highest peak at 5 d,with nerve cell death and apoptosis in group B.Conclusion The NFκB,may play an important role in brain injury with asphyxia. 　　【Key words】 NF，asphyxia, newborn rats, hypoxia ischemia reperfusion, brain tissue 　　脑组织中的NFκB能被许多因素激活，其中包括窒息后脑组织缺氧缺血再灌注损伤。近年来的研究发现NFκB还存在于脑血管内皮细胞、神经细胞和胶质细胞中，在调节炎症反应的基因中起关键作用，与脑缺血及再灌注损伤时的炎症机制密切相关[1]。本实验建立新生鼠窒息动物模型，旨在探讨NFκB信号途径在新生鼠窒息中的作用，为进一步治疗新生儿窒息提供新的思路。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物及分组 七日龄Wistar大鼠25只，由青岛市市立医院动物中心提供，雌雄不限，体重12～20 g。按同窝随机分成两组：对照组5只(A组)，窒息组(B组)20只，窒息组又分为4个亚组(Ba、Bb、Bc、Bd)，即分别于窒息后1、3、5和7d处死动物，每个时相点各5只。各组间体重无显著性差异(Pgt0.05)。 　　1.2 动物模型的建立 ①窒息动物模型：为更接近新生儿窒息病理过程(缺氧缺血再灌注损伤)，根据新生鼠常压窒息模型[2]，将实验动物分别置于容积为55 ml的缺氧瓶(即磨口瓶，保证密闭性)中，内装0.005 kg钠石灰，待动物安静后，塞紧瓶塞,密闭30 min后，立即氧罩吸氧2 h(氧浓度50%～60%)，之后放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。②对照组动物模型：模拟上述过程不塞紧瓶塞，仍由母鼠哺乳喂养。 　　1.3 方法 　　1.3.1 标本采集：分别于窒息后1、3、5和7d迅速横断各组新生鼠脊髓，在冰盘上快速取全脑组织，以冰生理盐水清洗至无血迹，切取含有海马组织的脑片，所有标本均经10%的中性福尔马林固定，经58～60℃石蜡包埋后