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游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞瘦素受体基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化的影响_医学论文
游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞瘦素受体基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化的影响_医学论文
作者：郭启煜 高妍 丛琳 邵宁生
【关键词】 脂肪酸类
关键词:脂肪酸类瘦素受体肌，骨骼/细胞学
摘 要:目的 探讨游离脂肪酸是否会对大鼠骨骼肌细胞Leptin受体的基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化产生一定的影响，进而导致胰岛素抵抗及葡萄糖代谢的异常. 方法 分离、培养新生Sprague-Dawley大鼠骨骼肌细胞，分别与软脂酸（0.25mmol#12539L-1 ）或油酸（0.125mmol#12539L-1 ）孵育12，24和36h，提取蛋白后用Western印迹法检测Leptin受体的蛋白水平.用RT-PCR检测胰岛细胞内Leptin受体RNA含量的变化.应用免疫沉淀法检测Leptin受体的酪氨酸磷酸化程度. 结果 软脂酸和油酸孵育后大鼠骨骼肌细胞Leptin受体的蛋白表达水平在孵育12和24h后同对照组相比无显著变化，在孵育36h后同对照组相比显著下调［软脂酸（0.36±0.03）和油酸（0.35±0.04）vs对照（0.39±0.05），0.05］Leptin受体的RNA水平在孵育12h后同对照组相比无显著变化，孵育24和36h后显著下调［24h:软脂酸（0.26±0.03）和油酸（0.26±0.04）vs对照（0.31±0.03），0.0536h:软脂酸（0.25±0.04）和油酸（0.23±0.03）vs对照（0.29±0.01），0.05］Leptin受体的酪氨酸磷酸化程度在在孵育12h后同对照组相比无显著变化，孵育24和36h后显著下调［24h:软脂酸（0.17±0.05）和油酸（0.15±0.06）vs对照（0.21±0.07），0.0536h:软脂酸（0.15±0.04）和油酸（0.13±0.04）vs对照（0.24±0.06），0.05］. 结论 游离脂肪酸可对大鼠骨骼肌Leptin受体的基因及蛋白表达水平以及磷酸化程度产生一定的抑制作用，从而进一步引起胰岛素抵抗.
Keywords:fatty acidsleptin receptorsmuscle，skeletal/cy-tology
Abstract:AIM To investigate effect of free fatty acid on gene and protein expression and tyrosine phosphorylation of leptin receptor in rat skeletal muscle cells.METHODS Skeletal muscle cells were isolated from new born Sprague-Dawley rats.After rat skeletal muscle cells were incubated with palmitate（0.25mmol#12539L-1 ）or oleate（0.125mmol#12539L-1 ）for12h，24h and36h，Western bolt was used to as-sess the protein abundance of Leptin-receptor in rat skeletal muscle cells.The RNA expression level of Leptin-receptor was revealed by RT-PCR.The tyrosine phosphorylation of Leptin-receptor was revealed by immuno-precipitation.RE┐SULTS After being incubated with free fatty acids（palmi-tate and oleate）for12and24h，there was no difference of the protein content of leptin receptor among rat skeletal mus-cle cells treated by palmitate and oleate and control cells（Pgt0.05）.The protein abundance of leptin receptor in rat skeletal muscle cells significantly decreased compared with control after incubated with palmitate and oleate for36h
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