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高中生物《第三章 第一节 菊花的组织培养》课件1 (新人教版选修1).ppt
指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生质体),在人工控制的培养基及环境条件(温度及光照)下,得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 又称:植物离体培养 一、植物组织培养的概念 概念:细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 原因:是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质 植物组织培养原理: 植物细胞的全能性 什么叫分化?其实质是什么? 什么叫脱(去)分化、再分化? 愈伤组织的细胞有什么特点? 如何控制细胞的脱分化与去分化? · 阅读32页解决下列问题: 二、植物组织培养的基本过程 基因的选择性表达 二、植物组织培养的基本过程 愈伤组织 三、影响植物组织培养的因素: 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 3、不同植物激素使用顺序 使用顺序 实验结果 先生长素, 后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素, 后生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 4、不同植物激素使用量 生长素/细胞分裂素比值 结果 比值高时 促根分化, 抑芽形成 比值低时 促芽分化, 抑根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题? 生长素 / 细胞分裂素 高 利于根和愈伤组织的形成 适中 利于根芽的分化 5、pH、温度、光照(菊花组培) pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 6、消毒 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 配制各种母液 配制培养基 灭毒 1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? 结果分析与评价 (一)对接种操作中污染情况的分析 (二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 (三)是否进行了统计、对照与记录 (四)生根苗的移栽是否合格 课题延伸(略) 练习 1.答:植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 2.答:外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。 菊花的组织培养 再分化 材料性质、营养物质、 调节物质、环境条件 外植体的消毒 接种 基本原理: 细胞的全能性 基本过程: 脱分化 愈伤组织 影响因素: 操作流程: 配制MS固体培养基 培养 移栽 栽培 *
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