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高中生物《第三章 第一节 菊花的组织培养》课件2 (新人教版选修1).ppt
4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种. ②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件. ③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分. 思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗? 答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。 (四)培养 1、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后,培养基成分接近耗尽,必须更换培养基,进行继代培养. 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同,在严格的无菌条件下,将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间,培养基中营养物质减少,外植体会分泌有毒物质,造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1-1.5cm时,就可以进行试管苗培养,否则还需进行第二代继代培养. 2、愈伤组织的继代培养 在愈伤组织继代培养期间,将恒温箱的门打开,让愈伤组织见光,愈伤组织见光后颜色可以转为绿色. 3、试管苗的培养 当愈伤组织长到一定大小后,可以更换培养基,进行试管苗的见光培养. (五)移栽 移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日. 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间. (六)栽培 3、移栽 珍珠岩:固体基质型,含水量高、蓄水性强、透性好,适合栽培. 幼苗长壮后,移栽到土壤中. 幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花. 三、课题延伸 1、一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养. 2、实例:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季. 本课题内容小结 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养 影响组织培养的因素 细胞分化 细胞全能性 组织培养过程 营养 激素 环境条件 MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 作业:P36 1、在植物组织培养过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。 2、在选取菊花茎段是,为什么要选取生长旺盛的嫩枝? 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 练习1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答: (1)①表示__________________,它能被培养成为④的根本原因是______________________________________。 (2)②表示____________,它与①相比分化程度__________,全能性____________. (3)若想制成人工种子,应选用____________。 (4)若①是花药,则④是____________,继续对其使用____________处理可获得____________正常植株,该过程称为__。 (5)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成④的叶片的颜色为____________,这说明____________。 (6)若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素,培养将进行到____________。 ④ ① 脱分化 ② 再分化 ③ 答案:(1)离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性 (2)愈伤组织 低 高 (3)③ (4)单倍体植株 秋水仙素 纯合体 单倍体育种 (5)绿色 含有表达叶绿体的基因 (6)② 练习2、 基因型为AaBb的水稻(含24条染色体)的花药通过无菌操作接入试管后,在一定条件下形成试管苗,问: (1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团,愈伤组织形成过程中,必须从培养基中获得_____________等营养物质。 (2)要促进花粉细胞分裂生长,培养基中应有_____________和_____________两类激素。 (3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根,再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照,其原因是_____________能利用光
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