植物组织培养在花卉上的应用.docVIP

植物组织培养在花卉方面的应用 摘要：随着生活水平的提高，人们对花卉的需求日益增加，对花卉质量的要求也越来越高。在我国，大多数的观赏植物均采用常规方法繁殖，如种子繁殖，扦插，嫁接，分株等方法，繁殖系数低，苗木质量差，繁殖周期长，品种推广慢，且受季节和自然发育的限制，严重阻碍了花卉业在我国的迅速发展。由于花卉植物遗传背景复杂，自然界的物种资源又有限，以往传统的播种方法和常规无性繁殖已经很难满足人们的要求。植物组织培养是20世纪发展起来的一项生物技术，经过几十年的发展，这项技术在基础理论和实际应用方面都获得了飞快的发展。植物组织培养培养技术具有独特的优势，能快速繁殖一些优良品种并进行脱毒，可以定向改良花卉的某个目标性性状而不改变其它原有性状，目前能用试管快繁的花卉近200种。本文综述植物组织培养技术在花卉方面的应用概况。 关键字：花卉；组织培养；污染；快繁 花卉组织培养，就是通过无菌操作分离花卉植物体的一部分，如花、茎尖、茎段、叶、幼胚等，并配合一定的营养、生长调节物质，通过严格控制温度、光照这些因素，使其迅速生长，能够缩短其生长周期，获得大量遗传性状一致的幼苗。 1花卉组织培养的方法和步骤： 1.1培养材料的采集 要根据培养目的适当选取材料，选择原则是：易于诱导、带菌少。要选取植物组织内部无菌的材料。这一方面要从健壮的植株上取材料，不要取有伤口的或有病虫的材料。另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织，有自身消毒作用，这种组织一般是无菌的。 　　从理论上讲，越是具有全能性的部位，其组培的成功性就越高，植物具有全能性的细胞通常有三类：一是受精卵；二是发育中的分生组织细胞；三是雌雄配子及单倍体细胞。在观赏花卉组织培养中，外植体材料的最佳选择是不同的，裸子植物：幼苗、芽和韧皮细胞；被子植物：胚、茎尖（茎段）、根、叶等组织或器官，而孢子植物组织的研究相对较少，目前取材多用叶。 1.2培养材料的消毒 从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基，便会2造成培养基污染。因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作接种到培养基上。 第一步 将采集来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，主要是放置在自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而定。 第二步 对材料的消毒灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、75%酒精、消毒液、无菌水、计时器等。先用酒精浸泡30s至1min,用无菌水冲洗，然后用消毒液浸泡数分钟（根据消毒液的不同浸泡时间长短不同），用无菌水冲洗数次。 1.3制备外植体 　　将已消毒的材料，用无菌刀、剪刀、镊子等，在无菌的环境下，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等，叶片则不需要剥皮。在操作中严禁用手触动材料。 1.4接种和培养 　　第一步　接种：在无菌环境下，将切好的外植体立即接在培养基上，每瓶接种１至２个，以防止交叉污染。 　　第二步　封口：接种后，瓶、管用封口膜封口，培养皿用封口胶带封口。 　　第三步　培养：将培养基位于培养室培养，温度大多保持在２５℃左右，但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。 1.5增殖 　　外植体的增殖是组培的关键阶段，在新梢等形成后为了扩大繁殖系数，需要继代培养。把材料分株或切断转入增殖培养基中，增殖培养基一般在分化培养基上加以改良，以利于增值率的提高。增殖１个月左右后，可视情况进行增殖。 1.6根的诱导 　　继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，必须转到生根培养基上进行生根培养。一个月后即可获得健壮根系。 1.7组培苗的炼苗移栽 　　试管苗从无菌到光照、温度、湿气稳定的环境进入自然环境，必须进行炼苗。一般移植前，先将培养容器打开，于室内自然光照下放３天，然后取出小苗，用自来水把根系上的营养基冲洗干净，再栽入已准备好的基质中，基质使用前最好消毒。移栽前要适当遮荫，加强水分管理，保持较高的空气湿度（相对湿度９８％左右），但基质不宜过湿，以防烂苗。 花卉组织培养中污染的防治 近年来，随着花卉组织技术在我国花卉种苗的生产和快速繁殖的广泛应用，花卉组织培养技术规模化的应用助推我国花卉行业蓬勃发展。在发展的同时也带来了严峻的考验，目前所面临的最大问题就是花卉组织培养中，发生污染的现象很严重，成为难以防范治疗的问题。 2花卉组织培养中污染的种类鉴别以及一些防范措施如下： 2.1在培养基中有可见的菌落。一些容易培养的菌类生长迅速，会很快蔓延整个组培瓶。这类污染可在工作人员每天的检查中及时发现并随时销毁，对整批植株生产造成的威胁并不大。 2.2潜藏的菌落（潜在性污染）的来源。在组