超声辐照维拉帕米微泡体外对神经母细胞瘤多药耐药的逆转作用.docVIP

超声辐照维拉帕米微泡体外对神经母细胞瘤多药耐药的逆转作用 陈镜宇1，全学模1，郭振华2，王 荞1，唐 毅1，王 佚2 （400014 重庆，重庆医科大学附属儿童医院：超声科1，普外科2） [摘要] 目的 探讨超声辐照维拉帕米（verpamil，VER）微泡逆转肿瘤多药耐药的作用及机制。方法 制备包裹维拉帕米的乳酸羟基乙酸共聚物（VER-PLGA）超声微泡造影剂；通过长春新碱（VCR）多次小剂量递增诱导法建立神经母细胞瘤耐药株（SK-N-SH/VCR），并检测其耐药性；根据处理因素不同分为6组：A:空白对照组（SK-N-SH/VCR培养组)、B: SK-N-SH/VCR+VER (50μg/ml) 组、C:SK-N-SH/VCR+VER(250μg/ml)组、D:SK-N-SH/VCR+超声辐照组、E:SK-N-SH/VCR+PLGA微泡+超声辐照组、F:SK-N-SH/VCR+VER-PLGA微泡(VER 50μg/ml)+超声辐照组。48 h后，利用RT-PCR和免疫组织化学染色法(ICC)检测各组细胞中MDR1基因及P-gp的表达水平，评估VER在不同处理组中逆转肿瘤细胞耐药的效果。结果　①成功制备包裹维拉帕米的乳酸-羟基乙酸共聚物（VER-PLGA）微泡造影剂，包封率为32%；②成功建立神经母细胞瘤耐药株SK-N-SH/VCR，MTT法证实其对不同化疗药物的耐药倍数