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分析化学第09章吸光光度法.ppt
*显示器 由检流计、数字显示、微机组 成的自动控制和结果处理系统 三. 仪器和方法 四、显色反应和显色条件的选择 1.显色剂作用 2. 显色反应的选择 3. 影响显色反应的因素 4. 显色剂的分类 1.作用 无色或浅色 试样 有色物 +显色剂 比色 显色反应 配合反应 氧化还原反应 缩合反应 重氮化—偶氮化反应 四、显色反应和显色条件的选择 2.显色反应的选择 灵敏度高 ?=104-105 (2) 选择性好 (3) 有色物组成恒定,化学性质稳定 (4) 显色剂在测定波长处无明显吸收 对比度=λmax有色物 -λmax显色剂>60nm 四、显色反应和显色条件的选择 吸光光度法 一 概述 吸光光度法: 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法。 分类:根据物质所吸收光的波长范围不同,分为紫外、可见及红外分光光度法。 基本方法: 有色物质浓度 ~ 颜色深浅 ~ 吸收光程度 通过比较颜色深浅(吸收光程度),测定物质的浓度。 方法的评价 适用面广 快速、简便 分析有色、无色、浅色物 溶液状态、均质固态样品 灵敏度高:浓度下限达10-5~10-6 mol·L-1 准确度高:相对误差通常为2~5% 一 概述 用于化学平衡等的研究 适用于分析半微量和微量的物质 二 吸光光度法的基本原理 1. 可见光与颜色 阳光 棱镜 连续光谱 物质 不连续光谱 可见光区的划分 : 400 450 500 550 600 650 760 λ/nm 互补光的对应关系 光的互补:蓝?黄 二 吸光光度法的基本原理 光谱示意 表观现象示意 2. 物质对光的选择性吸收 二 吸光光度法的基本原理 物质的颜色与光的关系 复合光 完全吸收 完全透过 吸收黄色光 复合光 (3)同一物质c不同时吸收曲线不同, λmax 不变; (4) λmax有特征性,可作为定性依据。 (1)同一物质对不同波长光的吸收程度不同; (2)每种物质都有一个最大吸收波长(λmax); 信息: 物质对光的选择性吸收及吸收曲线 A ? c1 c2 λmax 二 吸光光度法的基本原理 三. 光吸收定律 Beer - Lambert定律 Lambert 定律 : λ, c, T一定 A∝ 光程距离 (b) A ∝ 物质的浓度c - dI ∝ I db - dI = k1 I db 吸光度 二 吸光光度法的基本原理 λ, b, T一定 Beer定律 : Beer - Lambert定律——光吸收定律 A——吸光度 Io ——入射光强度 a——吸光系数 I——透射光强度 b——光程距离 c——浓度 当一束平行单色光通过溶液时,溶液的吸光度A与溶液的c和b成正比。 A ∝ bc 当 b 一定时, A ∝ c, 可以定量 二 吸光光度法的基本原理 吸收光 , A , 物质浓度 。 注意 : (1) 物质不吸光, I=Io , A=0 物质吸收部分光, I<Io, A>0 (2) A具有加和性,A总=A1+A2+…… +An (3)入射光的λ:可见光, 紫外光, 红外光 (4)光吸收定律的应用条件 稀溶液 入射光为单色光 二 . 吸光光度法的基本原理 (5)也可以用透射光强度(透射率T%)表示 T %的含义: 物质不吸收光 I=Io , T% =100% 物质吸收部分光, I<Io ,T%<100% T% ,物质的浓度 。 二 . 吸光光度法的基本原理 (6) 吸光系数的二种表示形式 浓度为1g·L-1的溶液,在某波长时,用1cm的比色皿,所测得的吸光度 浓度为1mol·L-1的溶液,在某波长时,用1cm的比色皿,所测得的吸光度 吸光系数a 摩尔吸光系数? 意义 单位 L/g·cm L/ mol ·cm A=abc A= ?bc 二 . 吸光光度法的基本原理 (1)? 在数值上等于c=1 mol ·L-1、b=1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。是吸收物质在一定波长和溶剂下的特征常数。 (2)不随c和b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时, ? 仅与吸收物质本身的性质有关,故? 可作为定性鉴定的参数。 摩尔吸收系数? 的讨论 二 . 吸光光度法的基本原理 (3)?是物质的吸光能力的度量。同一吸收物质在不同波长下的?值不同。在λmax处的?max表明了吸收物质最大限度的吸光能力,反映了测定可能达到的最大灵敏度。 (4)?max越大表明该物质的吸光能力越强,用光度
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