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第二节 微生物的营养、代谢和生长 三、微生物的生长 微生物生长的特点及测定方法 细菌细胞数目的测定 细菌重量的测定 细菌的生长曲线 调整期 对数期 稳定期 衰亡期 细菌群体生长四个主要时期比较 微生物生长曲线在实践中的应用 微生物生长曲线在实践中的应用 将少量的某种细菌接种到恒定容积的液体培养基中,并置于适宜的条件下培养,然后,定期取样测定培养基里的细菌群体的生长情况 影响微生物生长的环境因素 * 1.个体生长很不明显,持续很短时间就繁殖。 2.生长和繁殖交替进行,界限难以划分。 所以在实际的工作中,常以微生物的群体为单位来研究微生物的生长。 微生物群体生长的测定方法 测细胞数目 测重量:湿重或干重 待测样品 等量的已知含量的红细胞 混匀 涂抹 测定: 红细胞数目 细菌数目 计算单位体积内的细菌数目 待测样品 等量的已知含量的红细胞 混匀 待测样品 等量的已知含量的红细胞 涂抹 混匀 待测样品 等量的已知含量的红细胞 红细胞 细菌 取样:取一定体积的培养液 离心分离、反复洗涤 称湿重 烘干称干重 调整期 对数期 稳定期 衰亡期 成因: 适应环境 生长量: 一般不立即繁殖,代谢活跃,体积增长较快 代谢特点: 大量合成酶、ATP及其他成分(初级代谢产物) 生产应用及控制: 采用适宜的菌种和培养条件,缩短调整期 成因: 条件适宜 生长量: 快速繁殖时期。繁殖死亡.指数式增长 代谢特点: 代谢旺盛、个体形态、生理特征稳定 生产应用及控制: 获取菌种和科研材料 成因: 生存条件恶化? 生长量: 繁殖≈死亡。活菌数最多,接近K值 代谢特点: 代谢产物积累。产生次级代谢产物、(芽孢) 生产应用及控制: 连续培养。缩短培养周期,提高产量 成因: 生存条件极度恶化 生长量: 繁殖死亡。活菌数急剧下降 代谢特点: 畸形.自溶.释放代谢产物 生产应用及控制 代谢特点 生长量及测定 衰亡期 稳定期 对数期 调整期 一、接种菌种时期的选择 生产上常用对数期的细菌作菌种。因为处于对数期的细菌,生长繁殖速率快,代谢旺盛,如果用对数期的细菌接种到相同的培养基上,并在同一温度下培养,细菌仍以原来的生长速度继续其对数生长,而不会出现调整期,因而缩短了培养时间。 二、连续培养 连续培养就是在一个流动装置中,以一定的速度不断地添加新的培养基,同时又以同样的速度不断地放出老的培养基,以保证微生物对营养物质的需要,并排出部分有害代谢产物,使微生物保持较长时间的高速生长。连续培养的目的,就是要使微生物的生长曲线较长时间的维持在稳定期。因为在稳定期,微生物活体数目达到最高峰,细胞内大量积累代谢产物,生产效率高。 严格厌氧型: 兼性厌氧型: 好氧型: 影响微生物的呼吸或生命 氧气 酶被破坏或膜的稳定性被破坏,新陈代谢受阻 细菌:6.5-7.5 真菌:5.0-6.0 影响酶的活性和膜的稳定性 pH 低温时反应速度降低.高温时蛋白质和核酸的结构发生不可逆破坏 25℃-37℃ 影响蛋白质和核酸的结构 温度 不适宜因素的结果 最适条件 影响原因 环境因素 *
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