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蛋白质免疫印迹技术 汕头大学医学院肿瘤研究中心 BCA（Bicinchoninic acid）法： 二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子（Biuret reaction）并与BCA相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子，形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，根据吸光值可以推算出蛋白浓度。 不连续SDS（浓缩胶+分离胶） 浓缩胶和分离胶的PH值不同，前者主要表现为浓缩效用，后者表现为电荷效用和分子筛效用 样品浓缩： 蛋白质样品在快慢离子间被浓缩，并按蛋白质所带负电荷量的多少依次排列成带，浓缩样品。 分子筛效应 大分子运动慢，小分子运动快 电荷效应 电荷多的运动快，电荷少的运动慢 * * 2010.12 0.5 0.404 0.4 0.329 0.3 0.283 0.2 0.213 0.1 0.154 0.05 0.118 0.025 0.099 0 0.078 标准品浓度ug/uL 标准品OD值 * * *
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