观察叶绿体的形态和分布.docVIP

一、实验原理： 1、叶肉细胞中的叶绿体，散布于细胞质基质中， 呈绿色，扁平的椭球形或球形。 可以在高倍显微镜下观察到它的形态和分布。 2、线粒体普遍存在于植物细胞和动物细胞中。 线粒体的形态多样，有短棒状、圆球形，线形，哑铃形。 3、键那绿（Janus　green　Ｂ）染液：是专一性，染线粒体的活细胞染液。 可以使活细胞中的线粒体呈蓝绿色。而细胞质接近无色。 线粒体能在键那绿染液中维持活性数小时。 ４、通过染色，可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。 二、目的要求： １、初步掌握高倍显微镜的使用方法。 ２、观察叶绿体的形态和分布。 ３、观察线粒体的形态和分布。 三、材料用具： ⑴材料：藓类的叶（或菠菜叶、黑藻叶等）。 四、试剂： 　⑴新配制的质量分数为１％的键那绿染液（将０．５ ｇ键那绿溶剂于５ｍＬ生理盐水中，加温到３０～４０℃使其充分溶解）． 五、用具： ①显微镜②载波片③盖玻片④镊子⑤滴管⑥消毒牙签⑦铅笔 四、方法步骤： （一）制作鲜类叶片临时装片： 1、取材： ⑴用镊子取一片藓类的小叶，把根部去掉。 ⑵或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮。 2、制片： ⑴往载玻片中央滴一滴清水。 ⑵用镊子夹住所取的以上小叶或下表皮，放入清水滴中。 ⑶盖上盖玻片。 ⑷注意：临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态。 3、制作人口腔上皮细胞临时装片： ⑴在洁净的载波片中央滴一滴键那绿染液。 ⑵用消毒的牙签在自己漱静的口腔内壁上轻轻地刮几下， ⑶把牙签上附有碎屑的异端，放在染液中涂几下， ⑷盖上盖玻片。 （二）用显微镜观察叶绿体： 1、用低倍显微镜观察： ⑴对光： ①转动显微镜的转换器，让一个高倍物镜对准载物台中央的通光孔。 ②转动遮光器使一个大光圈对准通光孔。 ③左眼向目镜里看， ④同时右手转动反光镜，（光线弱时，用凹面反光镜。光线强时，用平面反光镜。） ⑤当视野中看到一个明亮的光圈时，光就对好了。 ⑵低倍显微镜观察： ①将制好的叶的临时装片，放在载物台上。 让要看的物体在通光孔的正中央。 ②用手逆时针（向内下）转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐下降，到快要接 近装片为止。 ③左眼注视目镜内的视野 ④用手顺时针（向外下）转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，到看到叶 片为止。 ⑤再来回转动细准焦螺旋，直到看清为止。 ⑥低倍镜下：小、多、亮。 2、用高倍镜观察叶绿体： ⑴换用高倍镜观察： ①找一个细胞、或细胞的一部分。移到通光孔正中央。 ②转动转换器，让一个高倍物镜头对准通光孔。 ??? ③（物镜头带螺丝。目镜头不带螺丝。 ??? 高倍物镜头长，低倍物镜头短。 ???高倍目镜头短，低高倍目镜头长、粗） ?? ④来回转动细准焦螺旋，直到看清细胞为止。 ?? ⑤如果视野太暗：可以用大光圈，凹面反光镜。 ?? ⑥高倍镜下：大、少、暗。 ⑵观察叶绿体： ①仔细观察叶片细胞内的叶绿体的形态。 ②仔细观察叶绿体的分布情况。 ⑷绘图： ①用铅笔画一个叶片细胞。 ??? ②画出叶绿体的形态和分布情况。 3、观察线粒体： ⑴在高倍显微镜下观察经过染色的人的口腔上皮细胞临时装片。 ⑵可以看到蓝绿色的线粒体。 ⑶细胞质接近无色。 ⑷高倍显微镜下观察到的叶绿体和线粒体（已经染过色）图形： ?五、结论： 将观察到的现象和得到的结论，《填写在实验报告册》上。 六、讨论： 1、讨论： ⑴描述叶绿体的形态和分布： 答案：叶绿体，散布于细胞质基质中，呈绿色，扁平的椭球形或球形。 ⑵描述线粒体的形态和分布： 答案：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球形，线形，哑铃形。