两种细胞系中内源性C_反应蛋白的表达和定位分析.pdfVIP

2008;28(5) 南方医科大学学报(JSouthMedUniv) 675 · · 两种细胞系中内源性C-反应蛋白的表达和定位分析 1,2 1 1 2 1 1 11 陈腾祥 李红梅 胡水旺 杨 婷 刘亚伟 刘靖华 姜 勇 南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋 , , , , , , ( 白质组学重点实验室 广东 广州 5105152贵阳医学院生理学教研室 贵州 贵阳 550004 , ; , ) 摘要 目的观察在不同刺激条件下 不同组织来源细胞系中内源性 反应蛋白 的表达及定位情况 方法 培养 C- CRP : , ( ) 。 人单核细胞系THP-1和人肝细胞系LO2用佛波酯 PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞 使用内毒素 LPS对两种 , ( ) ; ( ) 细胞进行刺激 同时收集LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清加入到LO2细胞的培养液中进行孵育 运用Western , , 和免疫细胞化学技术检测上述刺激条件下 在两种细胞中的表达及其定位情况 结果 检测表明 blot CRP 。 Westernblot , 在未受到刺激时 两种细胞的裂解物中均检测到一定量的CRP在细胞培养液上清中没有检测到 受到LPS刺激后 , , ; , THP-1细胞内的CRP表达增加 且在培养液上清中也检测到少量的CRP但对于LO2细胞 刺激前后CRP的表达和分 , , , 泌没有明显变化 当用LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清处理LO2细胞后 在 LO2的细胞裂解物和培养液上清 ; , 中均检测到CRP 免疫细胞化学检测结果显示 整个THP-1细胞中均可检测到标记的CRP的荧光信号 其中以核内的 。 , , 最明显 LPS刺激可以增加该蛋白的表达 使其核定位更加明显 在 LO2细胞中 CRP定位于核外 LPS刺激对其表达 , , ; , , 和定位没有明显影响 而给予LPS刺激的THP-1细胞培养液上清处理后 LO2细胞中标记CRP的荧光信号增强 尤其 , ,