农杆菌介导的世锦B悬浮细胞团转基因体系的初步建立.pdfVIP

作物杂志 　Crop s 20091 农杆菌介导的世锦 B 悬浮细胞团 转基因体系的初步建立 黎晶晶　官 杰 　陈 莹 　李绍波 　余 潮 　朱友林 　　摘 　要 　本试验初步建立了农杆菌介导的世锦 和籼稻 品种 中建立 了较为成熟 的农杆菌转化体 B 悬浮细胞团转基因体系 。利用世锦 B 成熟种子诱 系 [ 1, 2 ] ,这些转化体系均以在固体培养基上诱导获 导愈伤组织并悬浮培养 ,得到生长旺盛的细胞团。 得的愈伤组织作为转化材料 。较之愈伤组织悬浮细 将细胞团先在 N 6 Ⅱ培养基上预培养 1周 ,再用农杆 胞团具有个体小且均一 ,与培养基接触更充分 ,细胞 菌侵染并在 N 6 Ⅱ培养基上共培养 ,在含头孢霉素 代谢旺盛 ,分裂活跃等优点 。1994 年 , H iei等 [ 1 ] 利 250m g/L、羧苄青霉素 250m g/L 、潮霉素 50m g/L 的 用农杆菌对水稻悬浮细胞团进行转化 ,获得了 22 颗 N 6 I培养基上筛选 ,抗性愈伤接入 M SIC分化培养基 抗性愈伤组织 。1998年 ,尹中朝等 [ 3 ] 通过农杆菌转 Ⅱ 中 ,成苗后接入 M S 培养基中长成植株 。抗性植株 化细胞团得到了 10 株转基因植株 。这些试验为水 经 PCR 鉴定表明 ,外源基因已经整合到世锦 B 的基 稻的遗传转化提供了新的思路 。 因组中。 世锦 B 为正在生产上推广应用的杂交水稻世 关键词 　水稻 ;农杆菌介导 ;遗传转化 ;悬浮细 锦组合的保持系 [ 4 ] ,对世锦 B 进行遗传转化对生产 胞团 优质稻米具有重要意义 。本试验初步建成了世锦 B 悬浮细胞团的农杆菌转化体系 ,为大规模开展世锦 ( ) 水稻 O ry za sa tiva L 是世界上最重要的粮食 B 的转基因育种研究奠定了基础 。 作物之一 。提高水稻产量 ,改良稻米品质关系到人 1　材料与方法 类的生存和健康 。遗传转化是作物品种改良的重要 手段 ,因此 ,建立有效 、稳定的遗传转化体系一直受 11　试验材料 到水稻基因工程研究的关注 。目前 , 已在一些粳稻 水稻材料为世锦 B 的成熟种子 ,根癌农杆菌菌 作者简介 :黎晶晶,硕士 ,主要从事植物转基因研究 ,南昌大学生命科 株为本试验保存的 GV 3 10 1。双元表达载体 pR IT1 学与食品工程学院 , 33003 1,江西南昌 由日本国家基础生物研究所的 R Terada 副研究员 ( ) 官杰 ,陈莹 ,李绍波 ,余潮 ,朱友林 通讯作者 ,通讯地址同第 1作者 惠赠 。pR IT1 的 TDNA 区含有 1个潮霉素抗性基 ( ) 基金项 目:江西省科技计划攻关重点项 目 2006 1B0203105