分离差异表达基因的方法.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%%$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-). $%%$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 分离差异表达基因的方法 ! $ ! $ 黄 薇 方孝东 赵文明 林栖凤 ! （西安交通大学生命科学与技术学院，西安 !%%#4 ） $ （海南大学生物科学技术研究所，海口 0%$$） 摘 要 了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况，可以为研究生命活动过程 提供重要信息。以差别筛选，扣除杂交等基本方法为出发点，研究基因表达差异的方法不断完善，先后出现了 ， ， ， 微阵列（基因芯片）等技术。这里着重对这些方法的优缺点及改进进行了论述和评介， BBC1/DEC CBF GGH AB+F 并对技术的发展趋势进行了分析。 关键词 差异表达基因，代表性差异分析，抑制性扣除杂交， 微阵列 AB+F 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） I/J E !%%%/J%3! $%%$ %#/%0$!/%# 了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状 BBC1/DEC 以DEC 技术为基础，能将9C+F 表达差异进 态下的基因表达状况，可以为研究生命活动过程提供重要信 行放大，因此可以对低丰度9C+F 进行鉴定，具有操作简便， 息。从研究肿瘤发生开始，人们已经把基因表达差异的研究 灵敏度高的优点，但它也存在假阳性率高、重复性差、需要进 拓展到了诸如病理、植物胚胎发育、形态发生、信号传导、植 行大量的引物筛选工作、得到的特异 片段往往是 端 AB+F JL 物抗逆、抗病等众多领域。而分离与克隆相关基因是了解这 的非编码序列以及序列胶分析结果常呈弥散（ ）状态等 G926S ［］ 些生命过程的基础。早期使用的差别筛选技术和扣除杂交 不足之处4 。 法灵敏度低，工作量大，成本高，重复性差，已逐渐被淘汰。 自!44$ 年建立以来，差异显示法又经过了不少改进，如 以二者为出发点，分离差异表达基因的技术不断发展与完 引物、电泳条件、探针的标记等，使之得以不断完善。然而， ［］ 善，先后又建立了