反胶团萃取蛋白质技术的反萃过程研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（１）：１３４～１３８ 反胶团萃取蛋白质技术的反萃过程研究进展 １ ２ 夏传波 　杨延钊 （１济南铁道职业技术学院生物工程系　济南　２５００１３　２山东大学化学与化工学院　济南　２５０１００） 摘要　反胶团萃取分离技术是一种新型的生物产品分离技术。简要介绍了反胶团萃取蛋白质技 术的反萃过程的动力学，重点综述了在提高蛋白质反萃效率方面的研究进展，并对目前存在的问 题、发展方向等进行了评述。 关键词　反胶团　蛋白质　分离　反萃 中图分类号　ＴＱ４２３ 　　目前所采用的蛋白质分离纯化方法主要有盐析沉 程，高选择性、高活性地实现蛋白质反萃是需要解决的一 淀、凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水作用层析、亲和 个关键问题。虽然关于反胶团萃取蛋白质技术的综述性 层析和电泳等，这些方法存在的共同问题是连续操作 介绍已经很多，但是对其中反萃过程的综合述评还非常 和规模放大都比较困难。反胶团萃取是上世纪８０年 少，本文着重介绍反胶团萃取蛋白质技术的反萃过程的 代出现的一种新的生物产品分离技术，具有选择性高、 研究进展，并对今后的发展进行展望。 正萃与反萃可同时进行、分离与浓缩同步进行、操作简 单易于放大等优点，并能有效防止生物分子失活变性， １　反萃动力学研究 特别适宜于蛋白质的浓缩、分离与纯化。这一领域的 ［１］ 　　Ｄｕｎｇａｎ等 以二（２乙基己基）琥珀酸酯磺酸钠 研究一直相当活跃，目前已经有伴刀豆蛋白、细胞色素 （ＡＯＴ）／异辛烷反胶团体系萃取／反萃 胰凝乳蛋白酶 α ｃ、胰凝乳蛋白酶、溶菌酶、牛血清蛋白、胃蛋白酶等多 及细胞色素ｃ为例，研究了反胶团萃取／反萃蛋白质过 种蛋白质的反胶团萃取分离见于文献报道。 程的动力学。结果表明，蛋白质的萃取与反萃过程的 　　反胶团是表面活性剂溶于有机溶剂中形成的纳米 动力学有着非常显著的差异，反萃速率一般要比萃取 级聚集体，是一种透明、稳定的热力学体系。反胶团中 速率慢３个数量级。在萃取过程中，传质阻力主要集 表面活性剂非极性尾基向外与有机溶剂接触，极性头 中在靠近油水界面的水相边界层内，界面阻力通常可 基向内形成极性核，极性核溶入水后形成微“水池”，当 忽略；而在反萃过程中，传质阻力则主要集中于油水界 反胶团相与含蛋白质的水相接触时，蛋白质在表面活 面上。反萃过程可以分为三步，即含蛋白质的反胶团 性剂和蛋白质所带电荷间的静电相互作用以及疏水作 通过不断地与不含蛋白质的“空”反胶团交换内溶物而 用等作用力下进入微“水池”中，使蛋白质避免和有机 从主体溶液向界面迁移，到达界面后与界面碰撞并发 溶剂接触，不致失活。 生凝结，与此同时，蛋白质从反胶团中脱离而进入水相 　　反胶团萃取蛋白质技术包含两个过程：一个过程是