单克隆抗体_研究蛋白质折叠的新探针.pdfVIP

　　　 (C 　)　　　　　　 28　4 SCIENCE IN CHINA (Series C)　 1998 8 ———＊ 程　鹏　王锡德　静国忠　赵康源　周筠梅＊＊ (, 100101) 郭振泉 (, 100871) 　　利用竞争ELISA 的方法,发现溶液状态下 酶SNase R 及其7 个N-末端肽 段与M cAb2C9 之间的结合存在差别, 其中SNR121, SNR102, SNR79, SNR52 及 酶SNase R 能够与抗体较好地结合,而SNR141, SNR135, SN R110 与抗体结合很 弱.由于 酶和SNR52 均能与M cAb2C9 紧密结合, 其抗原决定簇应该包含在-6 ～ 52 序列中.因此, 不同长度的肽段与抗体结合能力直接与抗原决定簇的可接近程度 相关.比较不同长度的肽段与单抗McAb2C9 的结合能力, 清楚地表明肽链在从N- 末端向C-末端延伸的过程中, 其构象在不断调整直至形成完整的功能蛋白, 这一结 果有力地支持邹氏新生肽链折叠假说.单克隆抗体作为一种新型探针, 可为蛋白质 折叠机制的研究提供重要的信息. 　　　　　 (Staphylococcal n clease R, SNase R)N-[1] (M cAb2C9 M cAb1E5), . , , [2] . ,,. , ,、 , ,. N- , , . (Staphylococcal n clease R, SNase R)N-E .coli . (Staphylococcal n clease, SNase A)α+β,149 [3] , , .SNase R 　　　1997-05-19 , 1997-08-20 　　＊( 　 ＊＊ 4 　:——— 　　 303 SNase A ,SNase A N-6 (Asp-Pro-Thr-Val- [1] Tyr-Ser) . SNR141, SNR135, SNR121, SNR110, SNR102, SNR79, SNR52 -6 ～141, -6 ～135, -6 ～121, -6 ～110, -6 ～102, -6 ～79, -6 ～52 [1] SNase R N- . :, , [1,4] .N-C-, . ,、 [5, 6] (), . , [7, 8] ., ,. 1 　 1.1 　 1.1.1 　　　SNase R, N-SNR135 SN R102 , BALB/c (4 ～6 )3 :1 (SNase R 20μg, SNR135 SNR102 10 μg ),(0.5 mL/);2 2 ,,,1 ;1 6 (SNase R 3μg, SN R135 SN R102 1μg ),, (0.1 mL/).3 d , ,50%(PEG, MW1 500), SP2/0 , .10 ～15 d , [9] (ELISA) . SNase