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维普资讯 黑龙江动物繁殖 第 l4卷 第 l期 2006年 l7 动物体细胞克隆技术的研究进展 李光华,叶绍辉 (云南农业大学动物科学技术学院,云南 昆明 650201) 摘 要:本文就体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术 目前存在的问题 及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展。 关键词:体细胞克隆;体细胞核移植;细胞周期;转基因动物;基因组重编程 中图分类号:S814 文献标识码:B 文章编号:1005—2739(2006)01—0017—04 克隆(cloning)是英语 c“lone”音译 ,来源于希腊语 胞 、肌肉细胞和耳部皮肤细胞)的体细胞克隆牛诞生。 “klon”[1I,原意是扦插枝条,即无性繁殖。动物克隆指不 2000年6月 l6日,张涌等从成年羊的耳朵取下皮肤 通过精子和卵子受精过程而获得与亲本具有相同遗传 细胞培育出的世界首例成年体细胞克隆山羊 “元元”。 物质后代的过程。动物克隆包括孤雌生殖、卵裂球分离 1999年 12月到今年 1月,张涌教授领导的课题组在 与培养、胚胎分割和细胞核移植等。目前,生产哺乳动 一 只成年青山羊的耳朵上采集了体细胞,经过体外传 物克隆的方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种。所 代培养,选出5至 1O代的体细胞,用于组装克隆胚;同 谓细胞核移植,是指将不同发育时期的胚胎或成体动 时,他们将从屠宰场采集的山羊卵母细胞在体外培养 物的细胞核,经显微手术和细胞融合方法移植到去核 成熟,在组装过程中,去掉卵母细胞的细胞核,再把青 卵母细胞中,重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。细 山羊体细胞核注入去核的卵母细胞中。经过体外培养, 胞核移植技术,特别是细胞核连续移植技术可以产生 将发育到8细胞胚和囊胚移植给受体山羊。经过5个 无限个遗传相同的个体。由于细胞核移植是产生克隆 月的孕育,顺利产下 “元元”。另一只妊娠受体羊 “阳阳” 动物的有效方法,所以在一般情况下人们往往把它称 将于6月底前诞生。据专家介绍,培育 元“元”所采用 为动物克隆技术。过去人们认为,细胞的分化程度越 的克隆技术与英国体细胞克隆绵羊,所采用的克隆技 高,它指导早期胚胎发育成新个体的能力就越低,高度 术与克隆 “多莉”的技术羊 “多利”的技术完全不同。已 分化的高等成年动物体细胞甚至完全不具备这种基因 系统化为具有 自主知识产权的一整套动物体细胞克隆 组全能性。但是,1997年2月罗斯林(Roshilin)研究所 技术。 的伊恩-维尔穆特(I.Wilmut)等 宣布世界首例体细胞 1.2 不同种属问的体细胞核移植 克隆绵羊 “多莉”(Dolly)诞生一 这一突破性进展打破 1998年 1月,美国威斯康星一麦迪逊大学的科学 了这一观念。 家们以牛的卵子为受体,成功克隆出猪、牛、羊、鼠和猕 1 Dolly后的体细胞核移植研究的重要成果 猴5种哺乳动物的胚胎,表明某个物种的未受精卵可 1.1 同种属内的体细胞核移植 以同取 自多种动物的成熟细胞核相结合。虽然这些胚 1997年7月 ,罗斯林研究所和PPL公司f4I宣布用 胎都流产了,但它对异种克隆的可能性作了有益的尝 基因改造过的胎儿成纤维细胞克隆出世界上第 l头带 试。1999年,美国科学家用牛卵子克隆出珍稀动物盘 有人类基因的转基因绵羊 “波莉”(Polly)。显示了克隆 羊的胚胎。1999年,陈大元等将大熊猫的体细胞植入 技术在培育转基因动物方面的巨大应用价值。1998年 去核的兔卵细胞中,培育出了大熊猫的早期胚胎。2001 7月,美国T.Wakayama等II用小鼠卵丘细胞作核供体, 年,Loi等将欧洲盘羊的颗粒细胞移植到去核的绵羊卵 克隆出小鼠,而后又成功地用克隆出的小鼠卵丘细胞 母细胞中也克隆出欧洲盘羊。.这些成果说明克隆技术 作核供体,从中克隆出第 2代小鼠。他们克隆小鼠的技 有可能成为保护和拯救濒危动物的一条新途径。

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