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丙肝病毒实验室检测进展.pdf

National Medical Frontiers of China, Jun.2012, Vol.7 No.7 中国医疗前沿 2012年6月 第7卷 第11期 综述与进展  丙肝病毒实验室检测进展 杜慧 【摘要】 1989年Choc等应用分子克隆技术获得HCV病毒基因克隆,并命名本病及其病毒为丙型肝炎(Hepatitis C)和丙型肝 炎病毒(HCV)。HCV属黄病毒科,为单股正链RNA病毒。其主要通过血源传播,此外还可通过其他方式如母婴垂直传播、家 庭日常接触和性传播等。欧美国家多为HCV-Ⅰ型感染,而亚洲国家以Ⅱ型为主,Ⅲ型次之。其传染源主要为急性临床型和无 症状的亚临床患者、慢性患者和病毒携带者。人感染HCV后所产生的保护性免疫力很差,会再次感染,部分患者会导致肝硬 化及肝细胞癌。故对HCV进行实验室早检测早治疗非常重要。 【关键词】 丙型肝炎病毒;实验室检测;进展 doi:10.3969/j.issn.1673-5552.2012.11.0008 【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1673-5552(2012)11-0015-03 [1] 实验室检测丙肝病毒的方法主要有抗-HCV抗体检测、 出现假阳性 。 HCV抗原检测、HCV-RNA检测。 1.1.2 要注意试剂盒的选取:ELISA检测抗-HCV存在着明显 的缺陷,主要表现为非特异性反应,产生的假阳性较多。有文献报 1 抗-HCV抗体检测 到对5家国产EIA试剂盒进行评价,其抗干扰能力良莠各半,参 1.1 酶联免疫吸附实验(ELISA) 差不齐,假阳性率从0.37%-12.68%不等。产生假阳性的原因有 检测原理:ELISA检测抗-HCV IgG系利用固定在固相 以下方面:⑴高IgG血症:目前国内外的抗-HCV EIA试剂均采 载体(如普通酶标板、聚苯乙烯试管及小球、磁性微粒子等)上 用间接酶联免疫检测原理,间接法的一个重要影响因素是血清中 的HCV重组表达和/或人工合成多肽抗原,捕捉待测样品中 所含的高浓度的非特异性IgG对聚苯乙烯有较强的吸附力,非特 的抗-HCV IgG,然后,通过加入酶(辣根过氧化物酶HRP、碱 异性IgG可吸附到固相载体上或包被的抗原上造成假阳性;⑵类 性磷酸酶ALP等)标记的抗-人IgG检测所捕捉到的特异性 风湿因子的干扰:类风湿性关节炎患者血清或血浆中的类风湿 抗-HCV IgG。 因子为巨球蛋白IgM,可非特异性地吸附到固相载体上或包被的 1989年美国Chiron公司首先采用重组HCV C100-3融合 抗原上造成假阳性;⑶用于试剂制备的HCV抗原不纯:用于生 蛋白包被,建立了第一代HCV抗体检测方法。因其特异性差、灵 产抗-HCV EIA的HCV抗原主要有HCV核心区、NS3、NS4 敏度低很快被第二代抗-HCV试剂盒替代。第二代抗-HCV试 及NS5区蛋白,均为基因工程产物,如抗原的纯度太低,可产生 剂盒于1990年出现,它以HCV基因组NS3区的C33C和NS4区 非特异性反应。在临床实践中,对初检抗HCV阳性的标本,特别 的融合表达抗原(C200)再加上C区的核心抗原C22-3作为固相 是低S/CO比值(S/CO≤2)的标本,要倍加小心,应使用不同于

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