RAPD分子标记技术在蔬菜研究中的应用.pdfVIP

维普资讯 第24卷第3期 2005年3月 种 子(Seed) Vo1 ． 24No．3 Mar． 2005 3校 · 综 述 · RAPD分子标记技术在蔬菜研究中的应用 邓俭英 刘 忠 康德贤 方锋学 (广西农业科学院蔬菜研究中心 南宁 530007) 摘要：本文介绍了RAPD分子标记技术的原理和特点。综述了 随机扩增多态性DNA，是由美国科学家Williams等 】 这种分子标记技术在蔬菜分类学及遗传多样性研究、遗传图谱 和Welsh等 两个研究小组于 1990年分别研究提出 构建、基因定位、分子标记辅助育种及品种纯度鉴定方面的应 的一种分子标记，又称任意引物 PCR。它是建立在 用情况，并对其应用前景进行了评述。 PCR(PolymeraseChainReaction)IS]基础上的一种可对 关键词 RAPD 蔬菜研究 应用 整个未知序列的基因组进行多态性分析的DNA分子 标记技术。以样品DNA为模板，以一个人工合成的随 遗传标记作为基因型的易于识别的表现形式，在 机寡核苷酸序列(一般为8～1Obp)为引物，通过PCR 植物种质资源的研究和育种工作中有着十分重要的地 非定点扩增DNA片段，用凝胶电泳分析扩增产物 位。目前，应用较为广泛的遗传标记有形态标记、细胞 DNA片段的多态性，扩增片段多态性反应了基因组相 标记、生化标记和分子标记。形态标记指植物的外部 应区域的DNA多态性 J。 特征，细胞标记主要是染色体的核型和带型，生化标记 RAPD标记继承了PCR的优点，具有技术简单、 主要包括同工酶和贮藏蛋白。这3种标记都是基因表 检测迅速、灵敏度高、特异性强、检测容易、DNA样品 达的结果，是对基因的间接反映，其可利用的多态位点 用量少(通常15～25ng)的特点 川；并且可以对没有 较少，多态性较差，易受环境条件的影响。而DNA分 进行任何分子生物学研究的物种进行DNA多态性分 子标记技术(DNAmolecularmrakers)的本质是指能反 析，不具种属特异性，无需克隆、制备探针、分子杂交等 映生物个体或种群阅基因组中某种差异特征的DNA 工作，具有简便迅速、高效、实验成本低等优点。RAPD 片段。由于DNA分子中碱基的缺失、插入、易位、倒 技术是迄今为止发展最快、应用最广的一种DNA指纹 位、重排或由于长短与排列不一的重复序列等而产生 分析技术。但RAPD技术还存在以下一些缺陷 J：首 多态性，DNA分子标记便是检测这种多态性的技术， 先是显性遗传，不能识别杂合子和纯合子，这使得遗传 故DNA分子标记技术又称作分子诊断技术。由于