SRAP分子标记及其应用概述.pdfVIP

热带医学杂志 年 月第 卷第 期 20064 6 4 · · 467 文章编号 ( ) [ ] 1672-3619200604-0467-03 综述 · · SRAP分子标记及其应用概述 李巧燕 林瑞庆 朱兴全 , , 华南农业大学兽医学院寄生虫学教研室 广州 ( , ) 510640 摘要 序列相关扩增多态性 是近年来发展起来的一种新型分子标记系统 它具有简便 中等产 【 】 ( ) , 、 SRAP 量 高共显性 重复性 易于分离条带及测序等优点 最大的特点是它针对的是基因的阅读框区域 、 、 、 , ( )。 ORFsSRAP 标记中 引物的设计是关键 它是基于两个引物的扩增 上游引物长 对外显子进行特异扩增 下游引物长 , , , , , 17bp 特异扩增的是内含子及启动子区域 由于个体不同以及物种之间的内含子 启动子之间间隔长度不同而 , , 、 18bp 产生多态性 两个引物均由 端 的核心序列 和 端 个选择性碱基组成 其中核心序列又由长为 。 P , ’ , 5 14～15bp 3 3 的无特异性的填充序列以及 正向引物中 或 反向引物中 组成 且正向和反向引物中 ( ), ( ) 。 10～11bp CCGG AATT 的填充序列必须不同 扩增的过程采用复性变温法 前 个循环复性温度为 后 个循环则为 扩 。 , , , 5 35℃ 30～35 50℃ 增后的 片段可用聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳分离 银染或放射自显影检测 目前 已开始在植 , 、 。 DNA