猪流产嗜性衣原体病诊断方法研究进展.pdfVIP

SwineDisease 猪病防控 PreventionandControl 2014年第7期 猪流产嗜性衣原体病诊断方法研究进展 张文通1 魏 凤1,2 李 峰1,2 苗立中1,2 沈志强1,2 1 2 渊 山东绿都生物科技有限公司袁 山东滨州 256600曰 山东省滨州畜牧兽医研究院袁 山东滨州 256600冤 摘 要院 猪流产嗜性衣原体病是引起母猪流产袁 产弱胎尧 死胎的重要传染病之一袁 严重危害养猪业的健康发展遥 正确诊断对 防制该病极为关键遥 本文就该病的病原学诊断尧 血清学诊断尧 分子生物学诊断方法进行了综述遥 关键词院 猪流产嗜性衣原体曰 诊断方法曰 进展 中图分类号院S852.67 文献标识码院A 文章编号院1673-4645(2014)07-0030-03 猪流产嗜性衣原体病的病原是流产嗜性衣原体，该 可将病料接种于 McCoy或 HeLa229细胞或BHK细胞 病原能导致母猪流产、公猪生殖道疾病，甚至能导致孕 进行分离培养，但实际工作中因耗时、工作量大等难点 妇感染而引起流产。随着集约化养猪业的发展，该病的 并不常用，不适用于大规模的流行病学调查。 感染率有所增加，已受到越来越多从事养猪业工作者的 [1] 1.2 病原的鉴定 重视。在国外，Willigan等 首先于 1955年从患病猪病 [2] 料中分离到该病的病原；在国内，杨宜生等 于1982年 将采自典型部位病料或卵黄囊培养物涂片，Gimenez 首次从流产母猪及患关节炎仔猪病料中分离到该病的病 法染色镜检，可见蓝绿色、直径约为0.5～1.4 μm小大的 原。目前，全国大多数养猪地区都有关于该病的报道。 圆形产物，部分位于细胞内，大量散布于细胞外，聚集 [3] [4] [5] 邱昌庆等 、何启盖等 、罗建等 对部分地区猪血清衣 的群体形成网状小体。也可将病变组织涂片，采用姬姆 原体阳性率进行了调查研究，发现该病抗体阳性率普遍 萨染色法，镜检可观察到菌体呈紫红色或宝石红色，直 很高，说明该病在我国养猪业中广泛存在，应引起从业 径大约为0.1～0.6 μm，并可观察到红色的胞浆内包涵 人员的高度重视。目前该病还没有有效疫苗可供使用。 体。直接免疫荧光试验 （IFA）是OIE推荐的诊断方法， 本文就猪流产嗜性衣原体病的诊断方法进行综述，旨在 有商品化的试剂盒。将荧光标记的多克隆抗体或单克隆 为广大从事养猪生产或研究的工作人员提供参考。 抗体滴加到组织抹片或者细胞片，37℃湿盒孵育30分 钟，然后用PBS冲洗3次，自然晾干，在荧光显微镜下 1 病原学研究 进行观察，阳性的可见绿色荧光的包涵体。 1.1 病原的分离培养 2 血清学方法 病料分离常用的方法是鸡胚传代法和细胞培养法。 鸡胚传代法最为常用。将病料 （病料采集取自有症状或 2.1 间接血凝试验 渊IHA冤 病变部位，比如流产胎儿器官、胎盘和子宫分泌物，患 间接血凝试验是将抗原(或抗体)包被于红细胞表面， 关节炎的也可采集关节液）接种于孵化5～7天的鸡胚 成为致敏的载体，然后与相应的抗体(或抗原)结合，从 卵黄囊内。对于不能适应鸡胚传代的菌株或初次分离的 而使红细胞拉聚在一起，出现可见的凝集反应。该方法 菌株，建议将病料接种于无特定病原的小鼠或豚鼠。也 在临床检验中