猪盖他病诊断方法研究进展.pdfVIP

《上海畜牧兽医通讯》2013年第2期 · 25· 猪盖他病诊断方法研究进展 张小敏1 何 楚2 周 斌H 姜 焱¨ 210095 210095 (1南京农业大学动物医学院江苏 南京 2南京农业大学生命科学学院 江苏 南京 3江苏出入境检验检疫局 江苏南京210001) 【摘要】盖他病是由蚊虫传播的一种虫媒传染病，主要侵害马和猪。随着对猪盖他病毒研究的深入，人们建立了 许多用于检测猪盖他病毒的方法。文章综述了动物接种、病毒的分离、免疫酶测定技术、间接血凝试验、血清中和实 验、免疫荧光测定、琼脂扩散试验及分子生物学方法等，便于我们今后的研究。 关键词：猪盖他病毒；诊断；进展 盖他病毒(Getahvirus，GETV)是一种单链线形的RNA策略灵活性很大，某些方法在快速鉴定应用方面有很大的 病毒属披膜病毒科(Togaviridae)甲病毒属(Alphavirus)成优势。 员，该病毒广泛分布于亚洲地区及澳大利亚北部的太平洋沿 3．1 酶联免疫吸附试验(ELISA) 岸地区“’23。该病毒可以引起家畜疾病，如马的发热、皮疹、 酶联免疫吸附试验(ELISA)是根据酶免疫测定原理发 后腿水肿及淋巴结肿大，并能引起猪的流产等，因此该病毒 展的一种固相免疫酶技术，由于具有灵敏度高、操作简便、重 被确定为重要的动物源性病原体∞~53。 复性好等特点，是应用最广的免疫学技术。 近几年，有报道表示在我国的海南省、云南省、河北省、 梁勇等03用抗体捕捉ELISA方法对涉县、乡、村正常人 甘肃省均有盖他病毒分布¨3，表明我国存在该病毒的流行。 血清检测，IgM抗体阳性率为0．30％，该血清分布在25～30 众所周知，引起母猪繁殖障碍的传染性因子非常复杂，目前 岁年龄组；IgG抗体阳性率为16．30％，IgG抗体阳性血清也 国内外对已知病毒如猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪细小病毒 等都普遍进行了疫苗预防。然而，对盖他病毒引起母猪繁殖 株在HmLn一1细胞上增殖，并在HmLn一1细胞微量培养 障碍尚未引起注意。对此，猪场迫切需要及时诊断和定期检 板中进行测定，用其培养液制备ELISA抗原，用Lawry的方 疫猪盖他病。只有研究出快速、灵敏、准确、便捷的实验室诊 法测定抗原蛋白含量。用微量法进行HI试验，血清用丙酮 断方法，才有助于清除猪盖他病亚临床感染猪，更有效地控 处理取出非特异性抑制物，同时用鹅红细胞吸附。证明 制和扑灭猪盖他病。目前检测猪盖他病主要的方法有病原 313 ELISA值与HI效价密切相关，从日本不同地区收集了1 分离、血凝和血凝抑制方法，病原分离需要的时间长，而血凝 份肥育猪血清样品，用ELISA检测盖他病毒抗体，被检地区 和血凝抑制的特异性和敏感性不能满足检验检疫的需要，其 均检出该病毒抗体，阳性率为2．7％(1／37)～19．1％ 他分子生物学快速检测方法国内外未见有报道。现对已建 (40／209)；阳性率最低的为北海道，最高的为关东地区。在 立的诊断和检测猪盖他病的方法进行综述，为选择一种合 马来西亚、北澳大利亚和中国的人和鸟类血清样本中均检测 适、简便、特异的检测手段，以及对猪盖他病诊断方法标准化 到GETV病毒中和抗体。“”，DY0824病毒的分离提示 的研究提供参考。 GETV在山东省的蚊虫媒介中可能广泛存在，具有潜在感染 1实验动物接种 人或牲畜的可能n”，说明该病毒也可以引起人类感染。 乳鼠对盖他病毒甚为易感。一般采集病死乳猪的脑、 3．2 间接血凝抑制