蛋白药物聚乙二醇化修饰技术的研究进展.pdfVIP

临床合理用药圆园员员年员员月第源卷第员员月期摇 悦澡蚤灶 允 燥枣 悦造蚤灶蚤 葬造 砸葬贼蚤燥灶葬造 阅则怎早 哉泽藻，晕燥增藻皂遭藻则圆园员员，灾燥造郾源 晕燥郾员员月 ·员缘猿 · ·讲座与综述· 蛋白药物聚乙二醇化修饰技术的研究进展 李艳萍，张立虎 摇 摇 【关键词】摇 蛋白药物；聚乙二醇化；进展 【中图分类号】摇 砸 怨员源援员摇 【文献标识码】摇 粤摇 【文章编号】摇 员远苑源原猿圆怨远（圆园员员）员员月原园员缘猿原园圆 摇 摇 蛋白质药物主要有蛋白质激素和干扰素、血浆蛋白质、蛋 性提高而体外活性降低。一般与孕耘郧偶合的大分子，与未修 白质类生长调节因子和神经营养因子、黏蛋白、胶原蛋白、碱性 饰的分子相比，其物理与化学性质会发生改变，这些改变的性 蛋白、蛋白酶抑制剂和植物凝集素、白细胞介素、集落刺激因子 质包括构象、空间位阻、静电结合性质、疏水性等。与受体连接 等［员］。蛋白质药物由于具有作用专一、高效等特点，对人类健 的亲和力经常受到这些物理、化学性质变化的影响而降低。而 康发挥着重要作用，其原料有动植物细胞和微生物细胞等非人 修饰后蛋白在生物体内循环半衰期延长这一特性在体外活性 体来源。若将非人体来源的药物蛋白通过静脉注射常刺激机 检测时不能被体现，故而修饰后蛋白体外活性降低。 体的免疫系统产生特异性免疫应答，生成对该种蛋白的抗体； 猿摇 聚乙二醇化后检测与分析 继续注射该种蛋白后就会产生过敏性反应。即使不产生过敏 要从三方面来分析孕耘郧对蛋白质的修饰：（员）蛋白的平均 反应，免疫应答也会导致蛋白质失活或加快蛋白质的代谢，从 修饰度，即平均有多少个孕耘郧被偶联到蛋白分子上 杂贼燥 噪泽用 ［圆］ 荧光胺来测定，荧光胺与未偶合孕耘郧 的赖氨酸 圆 氨基反应生 而降低药物蛋白的疗效 。蛋白药物的疗效不仅取决于蛋白 ε 质特定的化学结构，还取决于其特定的空间结构，因此可以通 成荧光衍生物，通过测定蛋白混合物的激发荧光值来计算其平 过基因工程、化学修饰等手段对部分或全部缺陷进行弥补，其 均修饰度。这种方法不会受到未反应的孕耘郧干扰，仅需要纳 中化学修饰以其灵活多样、简便易行的优点得到了较为广泛的 克级的蛋白质。也能用氨基酸分析仪来分析 孕耘郧修饰蛋白 应用［猿］。 质。（圆）孕耘郧修饰的特定位点以及特定位点的修饰程度蛋白 员摇 化学修饰剂的类型及聚乙二醇的优点 质经修饰后，为了确定孕耘郧的偶联位点，可使用耘凿皂葬灶降解法 化学修饰剂与蛋白质的反应主要有酰化反应、烷基化反 来进行分析。过去对孕耘郧化的蛋白降解并不完全，最近用含 应、氧化和还原反应、芳香环取代反应等。有代表性的修饰剂 有蛋氨酸基团的两种特殊孕耘郧衍生物与蛋白质上的氨基酸残 有乙酰咪唑、卤代乙酸、 基共价结合后，以悦晕月 则处理将孕耘郧从蛋白质分子上去除，并 晕原乙基马来酰亚胺、碳化二亚胺、焦 碳酸二乙酯、四硝基甲烷、晕 原 卤代琥珀酰亚胺、羧甲基纤维 将其降解后通过质谱分析、核磁共振法等检测可识别修饰位 素、多聚唾液酸、聚氨基酸、葡聚糖、聚乙二醇等。与其它修饰 点。（猿）偶联有不同数目修饰剂的偶合物的各自相对含量，即 剂相比，聚乙二醇类修饰剂毒性小，无抗原性，具有良好的两亲 偶合物的均一性问题利用液相色谱法、杂阅杂原孕粤郧耘法等将偶 性，且生物相容性已经得到 ［源］ 合不同数目孕耘郧的偶合物分离开，并可计算出各成分的含量。 云阅粤 的认证 ，是应用最多的一类 修饰剂。聚乙二醇（孕耘郧）修饰技术，又称孕耘郧化，是一项利用 毛细管电泳是新发展起来的分析生物大分子的有效手段，有可 聚乙二醇衍生物对蛋白质进行修饰