人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达纯化及活性测定.pdfVIP

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2017-08-21 发布于重庆
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卷期生物工程学报 ! ! %’(!)(! 年月 #$$! ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-. #$$! - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定 ! ! ! ! # # 杨辉张英起颜真韩苇药立波苏成芝 ! # （第四军医大学生物技术中心，第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安） !$$7# 摘要获取的血管形成素片段，克隆入融合表达载体中，表达产物为端融 @40AB@ C+;5+;+?E)C @G94H ) D D F 合了的融合蛋白，以包涵体形式存在，占菌体总蛋白的。用／脲溶解包涵体，利用与过渡态金 I;J2 !$K 3:’L I;J2 属离子 #M高亲合力结合的性质，经 #M 亲和树脂一步法纯化，获得纯度达以上融合蛋白， ); ); 0)4C 63K I;J20C)N 结果表明在相应分子量处有一条特异性条带。重组蛋白复性后活性测定表明，在体外可促进鸡胚绒 O5JP5.+0’P 毛尿囊膜（）血管形成，并可降解。 BCQ P@)C 关键词血管形成素，融合蛋白，配体亲和层析 I;J2 中图分类号文献标识码文章编号（） @7!3 C !$$$07$2!#$$!$!0$$880$1 肿瘤的发生、发展有赖于新生血管的不断形成，、氯乙萘酚为上海生工产品； #M SA4N 10 ); 0)4C 人们一直寻找来自肿瘤细胞的介导血管生长的物 G5R-.J52H为产品；山羊抗人多抗、 F U;-5+ C)N D 质，希望其能成为新的肿瘤治疗药物，从而控制肿瘤及辣根酶标记的鼠抗羊的二抗为和北京 G-+P-B.,V ［］生长 ! 。年，首次从人结肠腺癌细胞系中山公司产品。