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核技术在家畜疾病控制和诊断中的作用  齐孟文  中国农业大学  1.放射性同位素 1.1辐射灭活疫苗（Radiation-attenuated vaccines） 疫苗是控制动物疾病的一种经济而有效的方法，对于病毒性疾病，因缺乏可 替代的治疗措施，其可能是唯一的控制方法，对于细菌和寄生虫疾病，为了避免 长期重复用药而致抗药性和残留危害的问题，接种疫苗也是值得推荐的方法。辐 射由于可以有效地灭活病原微生物，且基本不影响其免疫原性，因此被作为生产 灭活疫苗的方法。 FAO/IAEA 自 1964 年以来的 50 年间，致力于帮助发展中国家成功地开发了 各种疫苗，尤其是寄生虫病的疫苗，该行动虽然后来为基因重组技术生物疫苗出 现而被中断，但是在某些尚无有效生物疫苗开发的情况下，同时考虑到随冷冻干 燥保存技术的发展，整体细胞组织灭活疫苗的应用成为可能，辐射灭活疫苗仍有 用武之地。 图.疫苗生产全过程 1.2诊断试剂消毒(radiation sterilization) 生物性诊断试剂，如血清制品，其在跨国运输和使用中，出于生物安全考虑， 需要对样本进行消毒处理，因传统的化学消毒或热处理，可能影响试剂的选择性 和灵敏性，这时可考虑采用辐射灭菌，其一般不影响试剂的诊断性能。另外当样 本存在高度危险的微生物时，出于操作安全性考虑，在不影响实验性能情况下， 也可对其进行辐射灭活处理。 1.3放免分析诊断 (Radioimmunoassays) 放射免疫分析是指基于放射性同位素标记抗原 （简称标记抗原），对非标记 抗原（标准抗原或待测抗原）与数量有限的特异性抗体之间结合的竞争抑制性反 应的一种体外微量分析方法。方法将放射性测定的灵敏性与免疫反应的专一性相 结合，具有极高的灵敏性、特异性和准确性，为Aaron Berson于二十世纪 50 年 代创立，1977年，耶洛因为建立胰岛素的RIA检测方法而获得诺贝尔医学奖。该 方法曾开创了生物样品微量分析的先河，广泛用于动植物激素、生物活性物质及 农药残留的分析，通过测定致病微生物，如病毒、细菌和寄生虫，在宿主中产生 的抗体，以对其传染情况进行间接诊断。方法因为涉及放射性操作,因此在此方 法基础上，后来发展了其它非放射性免疫方法，如酶联免疫分析、荧光免疫分析 等，但因为其准确度度高，在动物激素等分析研究中仍然被采用。 图.夹心法免疫放射分析原理 1.4 DNA探针技术(Radiolabeled DNA probes) 免疫分析用于诊断存在三点不足：第一，从传染到检出抗体有一段时滞；第 二，侵染不能与接种情况相区分；第三，方法的灵敏性和特异性虽然完全满足筛 查实验的要求，但在某些情况下不足以判定传染是否发生或完全根除。随着分子 32 生物学实验技术，尤以DNA杂交技术和PCR技术的发展，基于 P-探针的核酸分子 杂交技术，结合PCR核酸分子扩増技术，可以通过检测致病微生物的极微量的外 源DNA，而直接诊断其传染情况，因此成为一种广泛适用的基因诊断方法。 图.分子杂交原理 图.分子诊断过程 2.稳定性同位素 2.1流行病朔源分析 动物传播疾病 许多流行性疾病是由动物，尤其是飞禽传播的，比如禽 流感,可对养禽业可造成灾难性经济损失，确定病微生物的来源和传播途径，对 于预防流行病的爆发具有重要意义。鸟类通过摄食和饮水，体内沉积有栖息地或 迁移途中环境的同位素指纹，并保留在代谢较缓慢的组织，如羽毛、爪子等，通 过建立地理环境同位素数据库，结合流行病学调查,即可对流行病源及其传播途 径进行确证。 虫媒传播疾病 许多疾病,