单分散亲水两性离子交换树脂的制备及其在生物大分子分离中的应用.pdfVIP

V01．28 高等学校化学学报 No．5 2007年5月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 83l一836 单分散亲水两性离子交换树脂的制备及其 在生物大分子分离中的应用 龚波林1’2，任丽1，阎超2，胡文志3 (1．宁夏大学能源化工重点实验室，银川750021；2．上海通微分析技术有限公司，上海201203； 0fBio-Functional SchoolofEnvironmentalEarth 3．Laboratory Chemistry，Graduate Science， Hokkmdo 060-0810，Japan) University，Sapporo 摘要采用分散聚合与溶胀聚合相结合的方法及高分子溶液致孔技术，成功地制备了粒径为5．0 p,m大孔和 超大孔结构的单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂，并进行了结构表征．将该树脂经胺化后再与 l，3一丙磺酸内酯反应，得到一种新型的两性离子交换(强阳一强阴型)高效液相色谱填料．研究了该填料对标 mL／min 准蛋白分离性能及流动相中有机溶剂、流速和pH值对蛋白保留的影响。实验结果表明，在流速为3 时，采用线性梯度洗脱，在4．0min内可同时快速基线分离3种酸性和2种碱性蛋白． 关键词 单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂；两性离子交换填料；蛋白质分离 文献标识码A J05-0831-06 中图分类号0658 文章编号0251-0790(2007 两性离子交换材料是一类在同一树脂颗粒内同时存在着阴、阳两种交换基团的材料．这类树脂中 的两种基团彼此接近，可以互相结合，又可以同时与阴、阳两种离子进行交换．两性离子交换材料作 涂敷，表现出一定的阴、阳离子保留特性．Yu等心’31首次通过化学键合法制备了硅胶基质的弱碱一弱酸 和强碱．强酸两种类型两性离子交换固定相，并应用于无机阴、阳离子的同时分离．1993年，Hu 等H。7 o在c。。柱表面涂敷两性表面活性剂，以纯水为流动相分离了不同的无机阴、阳离子对．但这类硅 胶基质两性离子色谱固定相的弱点是pH应用范围窄和不可逆吸附大，且聚合物基质在pH=1—14的 300树脂为基质并采用硅胶表面涂敷制备了聚合物强碱-强酸两性离子色谱固定相，用 品化的Spheron 于无机阴、阳离子的同时和单独分离．2004年，Fu等¨刚报道了弱碱一弱酸两性离子交换整体毛细管电 色谱柱分离极性有机化合物和小肽．以单分散树脂为基质的高效液相色谱填料具有优良的分离性 能，尤其对提高色谱柱效、增强色谱柱的穿透性和保持生物大分子活性非常有利．目前，无论是 3|，还是改进的“一步种子溶 Ugelstad【l¨发明的“两步种子溶胀聚合法”制备的各种类型聚合物微球¨2’1 胀聚合法”制备的交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球[14。，都采用线性聚苯乙烯为种子，但聚苯乙烯种子 疏水性强，对生物大分子会产生不可逆吸附． 本文在对单分散树脂研究¨卜埔1的基础上，采用分散聚合法制备了亲水性聚甲基丙烯酸环氧丙酯 种子和“一步种子溶胀聚合法”制备了5．0岬大孔单分散亲水性的交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯 (PGM一。)微球，进一步以该微球为基质并采用新的化学改性方法制备了一种强阴一强阳两性离子交 换色谱填料(Zwitterionicexchangepackings)．详细考察了该填料对标准蛋白分离性能及流动相中有机