SYSTEMS 中文说明书 UNIONHONEST.docVIP

SYSTEMS? 中文说明书 UNIONHONEST 酶联免疫吸附测试 Enzyme linked lmmunosorbent Assay _____________________________________________________________________________________ 人（Human）骨碱性磷酸酶（BALP）ELISA检测试剂盒 本试剂仅供研究使用  试验原理： BALP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BALP浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将BALP和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BALP的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制： 试剂盒成份 96孔配置 48孔配置 96/48人份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 塑料膜板盖 1块 半块 标准品：400u/l 1瓶（1.0l） 1瓶（0.5l） 空白对照 1瓶（1.0l） 1瓶（0.5l） 标准品稀释缓冲液 1瓶（8.0l） 1瓶（4.0l） 生物素标记的抗BALP抗体 1瓶（8.0l） 1瓶（4.0l） 亲和链酶素-HRP 1瓶（12l） 1瓶（5l） 洗涤缓冲液 1瓶（20l） 1瓶（10l） 底物A 1瓶（6.0l） 1瓶（3.0l） 底物B 1瓶（6.0l） 1瓶（3.0l） 终止液 1瓶（6.0l） 1瓶（3.0l） 自备材料： 1. 蒸馏水。 2. 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3. 振荡器及磁力搅拌器等。 4. 样品收集、处理及保存方法： 血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原 和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红 细胞迅速小心地分离。 2、 血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、 细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、 组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。 5、 保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 操作注意事项： ● 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 ● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 ● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 ● 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 ● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 ● 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 ● 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 ● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 安全性： 避免直接接触终止液和底物A、B，一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 试剂的准备： 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行： 400 u/l （6号标准品） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul 200 u/l （5号标准品） 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 100 u/l （4号标准品） 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 50 u/l （3号标准品） 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 25 u/l （2号标准品） 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 12.5 u/l （1号标准品） 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 0 u/l （空白对照） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。 试剂盒性能： 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。 特异性：不与其它细胞因子反应。 重复性