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差异显示和RACE技术的发展与应用.pdf
生物技术通报
·综述与专论· BIO TECHNOL O G Y BULL ETIN 2003 年第 1 期
差异显示和 RACE 技术的发展与应用
孔凡晶 马有志 陈孝 辛志勇
( 中国农业科学院作物所 农业部作物遗传育种重点实验室,北京 100081)
摘 要 : 差异显示是一套快速有效克隆差异表达基因的新技术 ,综述了该技术的原理及其技术改进、应用与
( )
展望。“快速扩增 cDNA 末端”Rapid Amplification cDNA End 技术即 RACE 技术 ,是获得全长 cDNA 的快速有效
的方法 ,阐述了该技术的发展与应用。
关键词 : 差异显示 RACE mRNA RTPCR
Development and Application of Differential Display
and RACE Techniques
Kong Fanjin g Ma Youzhi Chen Xiao Xin Zhiyong
( Key L ab of Crop Genetics and B reedi ng of Mi nist ry of A gricult ure Instit ute of Crop
)
B reedi ng and Cultivation Chi nese Academy of A gricult ural Sciences , Beiji n g 100081
Abstract : Differential display is one set of techniques to clone genes of differential expressing. The development and
improvement of the techniques were analyzed in detail , and the application of the techniques were also reviewed and
prospected. RACE ( Rapid Amplification cDNA End) is one technique used to generate fulllength cDNA efficiently and
rapidly , the principles and methods improvement was expounded.
Key words : Differential display RACE mRNA RTPCR
1 差异显示技术的原理及其改进 1. 1 引物设计及 PCR 条件的优化
差异显示是 Liang 等[1 ] 发明的一套快速有效克 引物的设计改进有以下三个方面: ( 1) 最初
隆差异表达基因的新技术 ,其基本原理是 :具有基因 Liang 所设计的引物是 :3′端为 5′T12 (A \ C \ G) (A
)
差异表达的组织细胞内的 mRNA 存在种类和数量
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