ESI质谱法研究7-二异丙基葛根素磷酸酯和溶菌酶的弱相互作用.pdfVIP

第24卷增刊 分析测试学报 V01．24 2005年11月 ofInstrumental NOV．2005 堕坠Ig里兰旦LXUEBAO(JoumalAnalysis) ESI质谱法研究7一二异丙基葛根素磷酸酯 与溶菌酶的弱相互作用 陈晓岚，袁金伟，屈凌波+，卢建莎 (郑州大学化学系河南省化学生物与有机化学重点实验室，河南郑州450052) 葛根素具有广泛的药理作用，临床上主要用于心脑血管疾病的治疗…。作为有机磷小分子化合 物，磷酰胺及其酯类衍生物大多具有广泛的生物活性【2J。由于磷酰基的引入，7一羟基黄酮的抗肿瘤 活性同磷酰化前相比有明显的提高po。为了进一步改善和提高葛根素药物仿生作用，本文首次采用 改造后的Atherton—Todd反应合成了7一二异丙基葛根素磷酸酯。另外，通过ESIMS研究了改造后的 葛根素衍生物与蛋白溶菌酶(1ysozyme)的弱相互作用的情况，对进一步研究具有生物活性的异黄酮 磷酸酯化合物以及与蛋白大分子之间的相互作用关系，将会起到重要参考作用。 HO f： 。、113。’2…。’2‘“((H3C)：Hc。)』3。 I ccl4，N(C2H5)3 +((CH3)2CHO)2PH——————————-l OH 0H 1 实验部分 1．1仪器与试剂 核磁共振波谱仪(Bruker 400)；Bruke—Esquire3000电喷雾质谱仪，质谱条件：采用正离子检 验模式，雾化气，(N：)压力14．00Pa，干燥气(N：)流速8．00L／min，(+)ESI离子源温度250oC，毛 000 细管电压4 V，锥孔电压117．9V，导入离子源速率4IxL／min。 无水甲醇、无水异丙醇、四氯化碳、三氯化磷、三乙胺、三氯甲烷(以上均为分析纯)，硅胶 mmol／L水溶液，甲醇溶液20．27mmol／L，自制二 (200—300目)，溶菌酶(购于Sigma公司)0．024 异丙基亚磷酸酯。 1．27一二异丙基葛根素磷酸酯的制备 取0．5 mL的圆底烧瓶中，加入6．5mL甲醇溶解完全后，加入1．2mL三乙胺， g葛根素置于50 在冰浴冷却的条件下搅拌；然后将0．5g二异丙基亚磷酸酯与3．0mL四氯化碳混合后，缓慢的将混 合液通过滴液漏斗滴人上述溶液中，滴定40rain，继续搅拌，自动恢复到室温。通过薄层色谱观察 反应，待反应完全后，停止搅拌。过滤除去不溶物，减压蒸除溶剂。所得残余物用硅胶柱分离(展 开剂CHCl，与CH。OH的体积比为4：1)，得到白色粉末状产物I：0．3g，产率60％，m．P．： 152～153℃，ESI 溶剂，TMS为内标，NMR谱上观察刭两组相关的信号。通过2D 的构象异构体被发现H’5|。”C NMR：6 Hz)，7．53、 CH3)；1H Hz)，6．83、6．82 7．46(1H，d，C6一H，J=9．2Hz)，7．43、7．41(2H，d，C2“，一H，J=9．2 基金项目：国家自然科学基金资助项目(113100531102)；河南省杰出青年基金资助项目(0512001400) 一26— 第6期 分析测试学报 增刊 (2H，d，C30，一H，J=8．4Hz)，4．91、