细菌的形态与结构的观察.pptVIP

细菌的形态与结构的观察 一、细菌的形态与结构 1.球菌 葡萄球菌 (葡萄状排列) 链球菌 (链状排列) 脑膜炎奈瑟菌 (成双排列) 2．杆菌 3．螺形菌 霍乱弧菌 （二）细菌的特殊结构 细菌的特殊结构仅为某些细菌所具有，而且特殊结构的形成受到一定条件的限制。虽然特殊结构不是细菌生存所必需的，但它们的存在将赋予细菌一定的功能，在致病性、抗原性以及在细菌的鉴别上都有一定的意义。 1.荚 膜 2.鞭 毛 3.芽 胞 （三）革兰染色法 细菌的染色方法很多，其中最为广泛使用的是革兰染色法。利用此法可将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两个大类。 原理 1.革兰阳性菌细胞壁结构致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入；而革兰阴性菌则相反，乙醇易渗入。 2.革兰阳性菌等电点比革兰阴性菌低，在相同PH条件下，革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多，故与带正电荷的碱性染料结晶紫结合牢固，不易脱色。 3.革兰阳性菌菌体含大量核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的细菌不被乙醇脱色；而革兰阴性菌则相反，易被脱色。 材料 1．菌种：葡萄球菌和大肠埃希菌的混合菌液 2．染色液：结晶紫染液、卢戈碘液、95%酒精、 稀释石炭酸复红 3．其他：玻片、生理盐水、酒精灯、接种环等 涂片步骤 革兰染色步骤 （1）初染：将涂片置于染色架上，滴加结晶紫染液1-2滴，10s后用水 冲洗，倾去余水。 （2）媒染：滴加碘液1-2滴，10s后水洗，倾去余水。 （3）脱色：95%的酒精脱色，加酒精后轻轻晃动玻片，约10s后水洗， 倾去余水。 （4）复染：滴加稀释石炭酸复红1-2滴，10s后水洗，倾去余水。待标 本自干或用吸水纸吸干后，在涂片上滴加镜油，置油镜下 观察。 结果 注意事项 a.染色液的滴加顺序和染色时间 b.脱色应准确把握时间，掌握适度。 c.用水冲洗时不能到水龙头上冲洗。 （四）油镜的原理及使用 以香柏油为观察介质，使得微生物图像更清晰明亮。主要有两个原因： 1.增加了视野的照明亮度； 2.香柏油作为介质增加了分辨率。 当光线由聚光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于玻片与空气密度不同，使光线发生折射，降低了视野的照明度。 若中间的介质是香柏油（其折射率与玻片折射率相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光亮，从而使物象更加清晰。 1.将待检标本放置载物台上用固定器固定，先用低倍镜找到标本所在处。 2.在载玻片上滴香柏油一滴，转成油镜观察。 3.使用油镜时，用眼睛从侧面看镜头，扭动粗调节旋钮使镜筒下降，油镜头浸入油内接近标本表面，但不要碰到玻片。 4.眼睛转移到目镜处观察，调节细调节旋钮，直到看到物象完全清晰为止。 5.油镜使用完毕，应立即用擦镜纸擦去镜头上的油，再用二甲苯擦拭 6.显微镜用毕，应将物镜转成八字形，集光器稍下降后，返还显微镜室。 * * 海南医学院热检学院病原生物教研室 符瑞佳 细菌的体积微小，在一定环境条件下，有相对恒定的形态与结构。由于细菌呈无色半透明，因此观察其形态必须通过显微镜并用适当的染色方法使细菌着色后才能观察清楚。 1．掌握细菌的基本形态； 细菌的特殊结构及其常用的检查方法。 2．初步掌握细菌涂片的制作、革兰染色方法。 3．掌握油镜的原理和使用方法。 目的要求 细菌的基本形态有球形、杆形和螺形三大类，不同的细菌又可表现出不同的排列方式，在细胞的鉴别上有一定的参考价值。 白喉棒状杆菌 大肠杆菌 炭疽芽胞杆菌 肺炎链球菌 伤寒沙门菌 破伤风梭菌 （1）涂片：取洁净玻片一张，用接种环按无菌操作取1～2环混合菌液在 玻片上涂成直径约1cm的均匀薄膜，然后立即将接种环烧灼 灭菌。每次取菌前后注意将接种环灭菌。 （2）干燥：涂片一般在室温下自然干燥，若须迅速干燥，可在火焰上方 的热空气中加温干燥，但切勿紧靠火焰，以免将标本烤干。 （3）固定：细菌的固定常用火焰加热法，即将上述已干的涂片在酒精 灯火焰上迅速通过三次，以玻片反面触及皮肤，热而不烫为 度。 * * *